如果你在真核系統(tǒng)上開展生物學(xué)研究，那么你有很大的機(jī)會要培養(yǎng)細(xì)胞。作為實驗的原材料，細(xì)胞的狀態(tài)很重要。不過，如今的實驗室中有無數(shù)的細(xì)胞系，每一種都有其*的生長特性，研究人員如何才能確定細(xì)胞培養(yǎng)物是健康的？

各大廠商已開發(fā)出一系列工具來監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)物。一些是專門的檢測，來監(jiān)控藥物篩選等應(yīng)用中的細(xì)胞變化。當(dāng)然，更多的是用于日常的細(xì)胞培養(yǎng)。在此，我們就來看看你有哪些選擇。

流式檢測

細(xì)胞健康并沒有一個定義。MilliporeSigma流式細(xì)胞應(yīng)用的研發(fā)主管Kamala Tyagarajan認(rèn)為，這個詞涵蓋了細(xì)胞的一切，包括細(xì)胞密度、倍增時間以及氧化應(yīng)激和凋亡狀態(tài)。不過，zui直接的指標(biāo)是細(xì)胞活力。

之前，細(xì)胞活力是利用*和臺盼藍(lán)來評估的。臺盼藍(lán)是一種無法透過細(xì)胞膜的染料，這意味著它會被健康細(xì)胞排斥，而只能進(jìn)入細(xì)胞膜受損的細(xì)胞。研究人員將染料與細(xì)胞混合，并移液至*，在獲得細(xì)胞計數(shù)的同時評估多少是活的。這個過程可以自動化，比如Bio-Rad的TC20自動細(xì)胞計數(shù)器。不過，你也可以選擇放棄臺盼藍(lán)，而轉(zhuǎn)投流式細(xì)胞儀的懷抱。

比如，MilliporeSigma的Muse® Count & Viability Assay就使用了兩種熒光染料的混合物，一種可染色所有有核的細(xì)胞，另一種則染色無活力的細(xì)胞。通過在Muse細(xì)胞分析儀上分析染色的細(xì)胞，研究人員可獲得樣品中的細(xì)胞總數(shù)和活細(xì)胞數(shù)量。

據(jù)Tyagarajan介紹，MilliporeSigma為Muse細(xì)胞分析儀開發(fā)了超過25種檢測，其中有10種可評估細(xì)胞健康，同時還為其他流式細(xì)胞儀（如Guava easyCyte系統(tǒng)）開發(fā)了其他檢測。這些檢測可監(jiān)控凋亡、氧化應(yīng)激、線粒體健康以及細(xì)胞周期狀態(tài)。

Bio-Rad的CytoTrack™檢測也是基于流式細(xì)胞儀，可監(jiān)控細(xì)胞增殖。該公司細(xì)胞生物學(xué)的產(chǎn)品Chris Linnevers表示，CytoTrack根據(jù)特定染料的豐度來提供細(xì)胞增殖的量度。在CytoTrack檢測中，染料被上樣到細(xì)胞中，隨著細(xì)胞的分裂，每個細(xì)胞中的染料數(shù)量降至一半。通過流式細(xì)胞儀的分析，研究人員可計算細(xì)胞分裂了多少次。

成像檢測

許多公司，包括Bio-Rad、Essen Bioscience和GE Healthcare，也開發(fā)出成像平臺，能夠捕獲形態(tài)變化，從而監(jiān)控細(xì)胞培養(yǎng)物。

比如，Bio-Rad的ZOE™熒光細(xì)胞成像儀是一個臺式手動顯微鏡，將平板電腦那樣的界面與倒置顯微鏡和數(shù)字熒光成像能力融為一體。ZOE具有一個明視場和三個熒光通道，“是常規(guī)監(jiān)控細(xì)胞健康的好工具，特別是表達(dá)熒光蛋白的細(xì)胞”。即便如此，研究人員也可使用該公司的VivaFix™試劑，這種染料可與伯胺結(jié)合，利用活細(xì)胞和死細(xì)胞之間的染色強(qiáng)度來區(qū)分它們。

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