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常見的免疫檢測五大技術

來源:金湖大華自動化儀表有限公司   2014年08月07日 15:39  
  (一)免疫酶染色試驗(immunoenzymestainingtest,IEST)免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養物涂片為固相抗原,當其與待測標本中的特異性抗體結合后,可再與酶標記的第二抗體反應形成酶標記免疫復合物,后者可與酶的相應底物作用而出現肉眼或光鏡下可見的呈色反應。
  
  (二)皮內試驗(intraderrpmaltest,ID)宿主在病原體刺激后,體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合后,肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒,釋放生物活性物質,引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈,以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。
  
  (三)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)
  
  1.免疫擴散于一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型:①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環,其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置,二者可自由擴散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。
  
  2.免疫電泳是將免疫擴散與蛋白質凝膠電泳相結合的一項技術。事先將抗原在凝膠板中電泳,之后在凝膠槽中加入相應抗體,抗原和抗體雙相擴散后,在比例合適的位置,產生肉眼可見的弧形沉淀線。
  
  (四)酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)
  
  vvv酶聯免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結合,使其保持免疫反應和酶的活性。把標記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結合,再使之與相應的無色底物作用而顯示顏色,根據顯色深淺程度目測或用酶標儀測定OD值判定結果。
  
  (五)對流免疫電流試驗(counter-immunoelectrophoresis,CIE)對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質的一種快速,敏感的電泳技術。既可用已知抗原檢測抗體,又可用已知抗體檢測抗原。反應結果可信度高,適用范圍廣。以本法為基礎改進的技術有酶標記抗原對流免疫電泳(enzyme-linkedantigencounterimmunoelectrophoresis,ELACIE)和放射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoreticautography,RCIEPA)等技術。二者克服了電泳技術本身不夠靈敏的弱點。
  
  (六)間接紅細胞凝集試驗(indirecthaemagglutinationtest,IHA)以紅細胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細胞與特異性抗體結合而產生凝集,抗原與抗體間的特異性反應即由此而顯現。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞。

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