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外泌體純化方法有哪些以及其優缺點

時間:2023/11/7閱讀:634
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外泌體研究自過去二十年以來一直是焦點領域。人體內多種細胞在正常以及病理狀態下均可分泌外泌體,如間充質干細胞、內皮細胞、腫瘤細胞、骨髓細胞、免疫細胞等。外泌體與干細胞有著類似的功能,在組織工程與再生醫學方面的臨床前期研究,尤其是干細胞外泌體。那么一起來學習一下外泌體純化方法有哪些以及其優缺點吧!

1. 超速離心法是常用的外泌體純化手段,也是普遍認可的一種方式,采用低速離心、高速離心交替進行,可分離到大小相近的囊泡顆粒。

優點:無需特殊試劑,操作簡便,適合大批量樣本。缺點:耗時耗力,純度相對較低,回收率不穩定,重復離心會一定程度損傷外泌體,設備要求高。

2. 抗體親和(磁珠)法利用包被單克隆抗體的磁珠結合外泌體,外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結合,即可將外泌體吸附并分離出來。

優點:純度較高,特異性和重復性好、操作簡便、無設備限制。缺點:效率和回收率較低,僅能捕獲表達特定抗原的目標外泌體,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,囊泡完整性影響較大。

3. 微流控指的是使用微管道(尺寸為數微米到數百微米)處理或操縱微小流體(體積為納升到阿升)的系統所涉及的科學和技術。這種方法具有分離生物顆粒速度快,純度高,節省樣本,集成度高等優點。因此,雖然微流控技術在外泌體分離方面的應用仍處于起步階段,卻已經成為了當前研究的熱點。目前,近些年,基于微流控的外泌體分離技術也在不斷出現。

4. 尺寸排阻色譜(SEC)是基于尺寸而非分子量分離大分子,尺寸排阻色譜可以精確地分離大分子和小分子。SEC主要用于分離血液和尿液中的外泌體,不過,這種外泌體提取方法需要很長時間,并且不適合處理大量樣品。

以上就是有關于外泌體純化方法有哪些以及其優缺點的問題探討,如果你想了解更多請咨詢百奧創新客服哦! 


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