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HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:劉小姐查看聯(lián)系方式

更新時間:2017-08-11 16:24:42瀏覽次數(shù):119次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領域 科研
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸
英文名稱:HCCLM3(highly metastatic human hepatocellular carcinoma cell)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0834
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

KIT  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ             96T
TGF- Beta1(Human Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit  人轉化生長因子β1             96T
HL ELISA Kit  大鼠肝脂酶             96T
Mouse trypsin ELISA Kit  小鼠*             96T
N-AChR ELISA Kit  大鼠煙堿型乙酰*受體             48T96T
TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha) ELISA Kit  人轉化生長因子α             96T
ODF(Mouse osteoclast differeiation factor) ELISA Kit  小鼠破骨細胞分化因子             96T
M-AChR ELISA Kit   大鼠毒蕈堿型乙酰*受體             96T
TLR-9/CD289(Mouse Toll-like receptor 9) ELISA kit  小鼠Toll樣受體9             96T
SDF-1 Beta/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit  人基質細胞衍生因子1β             96T
SCFR(Human Stem Cell Factor Receptor) ELISA kit  人干細胞因子受體             96T
Lep IgG(Mouse Leptospira IgG) ELISA Kit  小鼠鉤端螺旋體IgG             96T
APC ELISA Kit  大鼠活化蛋白C             96T
GAL ELISA Kit  大鼠甘丙肽/甘丙素             96T
GHRP-Ghrelin(Mouse growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit  小鼠生長激素釋放肽ghrelin             96T
SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit  人干細胞因子/肥大細胞生長因子             96T
sCD40L(Human Soluble Cluster of differeiation 40 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD40配體             96T
vaspin(Mouse Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  小鼠內臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑             96T
a-Glu ELISA Kit  大鼠α葡萄糖苷酶             96T
ODF ELISA Kit  大鼠破骨細胞分化因子             96T
BrdU(Mouse Bromodeoxyuridine) ELISA Kit  小鼠溴脫氧核苷*             96T
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)保存運輸sCD30L(Human Soluble Cluster of differeiation 30 ligand) ELISA Kit  人可溶性CD30配體             96T
RAES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit  人正常T細胞表達和分泌因子             96T
TGF Beta2(Mouse transforming growth factor Beta2) ELISA Kit  小鼠轉化生長因子β2             96T
TLR-9/CD289 ELISA kit   大鼠Toll樣受體9             96T
Lep IgG ISA Kit   大鼠鉤端螺旋體IgG             96T
Alpha1-MG(Mouse Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  小鼠α1微球蛋白             96T
P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) ELISA kit  人P選擇素             96T

 

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