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RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸

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更新時間:2017-08-11 14:56:10瀏覽次數(shù):206次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸
英文名稱:RBL-2H3(ratneutrophilsalkalinecell leukemia)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0750
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
2,3-DPG(Human 2,3-Disphosphoglycerate,2) ELISA Kit  人2,3-二磷酸甘油酸    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LUM(Human lumican) ELISA Kit  人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
NHE3(Human Na+/H+ exchanger 3) ELISA Kit  人Na+/H+交換體3    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit  人孤腓肽    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ST1(Human Stromelysin-1) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ST2(Human Stromelysin-2) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit  人基質(zhì)裂解素    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LXA4(Human Lipoxin A4) ELISA Kit  人脂氧素A4    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit  人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone) ELISA Kit  人β-促脂素    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LTA(Human lipoteichoic acids) ELISA Kit  人脂磷壁酸    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AD(Human amiodarone) ELISA Kit  人乙胺碘呋酮    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SA(Human Sialic acid) ELISA Kit  人唾液酸    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit  人鞘磷脂    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit  人尿游離*    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ASCA(Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody) ELISA Kit  人抗釀酒酵母抗體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VLA4(Human very late appearing antigen 4) ELISA Kit  人遲現(xiàn)抗原4    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit  人吖啶橙    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
MTX(Human methotrexate) ELISA Kit  人甲胺喋呤    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PABA(Human para-aminobenzoic acid) ELISA Kit  人對氨基苯甲酸    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LPA(Human L-phenylalanine) ELISA Kit  人苯*    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Irna(Human Immune RNA) ELISA Kit  人免疫核糖核酸    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
BRBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)保存運(yùn)輸eta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit  人β萘酚    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
BLI(Human Beta-Lactamase inhibitors) ELISA Kit  人β內(nèi)酰胺酶抑制劑    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Gal(Human Alpha-galactoyl) ELISA Kit  人α半乳糖基抗體    現(xiàn)貨供應(yīng)

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