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B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片

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更新時(shí)間:2017-08-07 14:28:07瀏覽次數(shù):105次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱(chēng):B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片
英文名稱(chēng):B16-F10metastatic mouse melanomacells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0113
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

芍藥苷    英文名稱(chēng):    Paeoniflorin    :    23180-57-6    分子式:    C23H28O11    480.46    20mg
芍藥內(nèi)酯苷    英文名稱(chēng):    Albiflorin    :    39011-90-0    分子式:    C23H28O11    480.46    20mg
丹皮酚    英文名稱(chēng):    Paeonol    :    552-41-0    分子式:    C9H10O3    166.17    20mg
濱蒿內(nèi)酯    英文名稱(chēng):    Scoparone    :    120-08-1    分子式:    C11H10O4    206.19    20mg
東莨菪內(nèi)酯    英文名稱(chēng):    Scopoletin    :    92-61-5    分子式:    C10H8O4    192.17    20mg
二氫    英文名稱(chēng):    Hydrocoumarin    :    119-84-6    分子式:    C9H8O2    148.16    20mg
7-羥基-4-甲基    英文名稱(chēng):    4-Methylumbelliferone    :    90-33-5    分子式:    C10H8O3    176.17    20mg
*    英文名稱(chēng):    7,8-Dihydroxycoumarin    :    486-35-1?    分子式:    C9H6O4    178.14    20mg
傘形花內(nèi)酯    英文名稱(chēng):    7-Hydroxycoumarin    :    93-35-6    分子式:    C9H6O3    162.14    20mg
    英文名稱(chēng):     Coumarin     :    91-64-5    分子式:    C9H6O2    146.14    20mg
*    英文名稱(chēng):    Norcantharidin    :    5442/12/6    分子式:    C8H8O4    168.15    20mg
斑蝥素    英文名稱(chēng):    Cantharidin    :    56-25-7    分子式:    C10H12O4    196.2    20mg
畢靈堿    英文名稱(chēng):    (+)-Bicuculline    :    485-49-4    分子式:    C20H17NO6    367.35    20mg
白頭翁皂苷B4    英文名稱(chēng):    Anemoside B4    :    129741-57-7    分子式:    C59H96O26    1221.38    20mg
白頭翁素    英文名稱(chēng):    Anemonin    :    90921-11-2    分子式:    C10H8O4    192.17    10mg
蝙蝠葛蘇林堿    英文名稱(chēng):    daurisoline    :    70553-76-3    分子式:    C37H42N2O6    610.747    10mg
蝙蝠葛堿    英文名稱(chēng):    Dauricine    :    524-17-4    分子式:    C38H44N2O6    624.774    20mg
蝙蝠葛氰苷    英文名稱(chēng):    Menisdaurin    :    "67765-58-6
"    分子式:    C14H19NO7    "313.13
"    10mg
蝙蝠葛新諾林堿    英文名稱(chēng):    Dauricinoline    :    30984-80-6    分子式:    C37H42N2O6    610.747    10mg
B16-F10 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞圖片N,N’-二甲基蝙蝠葛堿碘化物     英文名稱(chēng):    N,N’-dimethyldauricine iodide     :        分子式:    "C40H50N2O62+·2I-
"    "908.64
"    10mg
乙酰蝙蝠葛蘇林堿    英文名稱(chēng):    O-diacetyldaurisoline     :        分子式:    C41H46N2O8    694.82    10mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ    英文名稱(chēng):    Atractylenolide 1    :    73069-13-3    分子式:    C15H18O2    230.3    20mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ    英文名稱(chēng):    Atractylenolide II    :    73069-14-4    分子式:    C15H20O2    232.32    20mg
白術(shù)內(nèi)酯III    英文名稱(chēng):    Atractylenolide III    :    73030-71-4    分子式:    C15H20O3    248.32    20mg
蒼術(shù)素    英文名稱(chēng):    Atractylodin    :    55290-63-6    分子式:    C13H10O    182.22    20mg
蒼術(shù)苷A    英文名稱(chēng):    Atractyloside A    :    126054-77-1    分子式:    C21H36O10    448.5    20mg
茅蒼術(shù)醇     英文名稱(chēng):    Hinesol    :    23811-08-7    分子式:    C15H26O    222.37    10mg

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