產(chǎn)品名稱：HET-1A 人食管上皮細(xì)胞保存運(yùn)輸
英文名稱：HET-1A human esophageal epithelial cells
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0074
HET-1A 人食管上皮細(xì)胞保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
HET-1A 人食管上皮細(xì)胞保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

11-3    分子式：    C44H69NO12    804.02    20mg
L-*     英文名稱：    L-Leucine    :    61-90-5    分子式：    C6H13NO2    131.17    20mg
賴氨酸    英文名稱：    L-Lysine    :    56-87-1    分子式：    C6H14N2O2    146.19    20mg
L-*    英文名稱：    L-Tyrosine    :    60-18-4    分子式：    C9H11NO3    181.19    20mg
馬來(lái)酸    英文名稱：    Maleic acid    :    110-16-7    分子式：     C4H4O4    116.07    20mg
尿素    英文名稱：    Urea    :    57-13-6    分子式：    CH4N2O    60.06    200mg
L-*鹽酸鹽    英文名稱：    L(+)-Ornithine hydrochloride    :    3184-13-2    分子式：    C5H13ClN2O2    168.62    20mg
三聚氰胺    英文名稱：    Melamine    :    108-78-1    分子式：    C3H6N6    126.12    200mg
L-*    英文名稱：    L-Threonine    :    72-19-5    分子式：    C4H9NO3    119.12    20mg
L-*    英文名稱：    L-Serine    :    56-45-1    分子式：    C3H7NO3    105.09    20mg
L-天冬氨酸    英文名稱：    L(+)-Asparagine monohydrate    :    5794-13-8    分子式：    C4H10N2O4    150.13    20mg
天冬酰胺    英文名稱：    "L-Aspartic acid
"    :    56-84-8    分子式：    C4H7NO4    133.1    20mg
*    英文名稱：    Ubenimex    :    58970-76-6    分子式：    C16H24N2O4    308.37    20mg
*    英文名稱：    Vitamin A    :    68-26-8    分子式：    C20H30O    286.45    20mg
*    英文名稱：    Vitamin C    :    50-81-7    分子式：    C6H8O6    176.12    20mg
*    英文名稱：    Vitamin E    :    13959-02-9    分子式：    C6H4BrNO2    202.01    20mg
*12    英文名稱：    Vitamin B12    :    68-19-9    分子式：    C63H88CoN14O14P    1355.37    20mg
*3    英文名稱：    Menadione    :    58-27-5    分子式：    C11H8O2    172.18    20mg
L-*    英文名稱：    L-Valine    :    72-18-4    分子式：    C5H11NO2    117.15    20mg
*    英文名稱：    Nicotinamide    :    98-92-0    分子式：    C6H6N2O    122.12    20mg
*    英文名稱：    Nicotinic acid    :    59-67-6    分子式：   HET-1A 人食管上皮細(xì)胞保存運(yùn)輸 C6H5NO2    123.11    20mg
L-異*    英文名稱：    L-Isoleucine    :    73-32-5    分子式：    C6H13NO2    131.17    20mg
*    英文名稱：    Laurocapram    :    59227-89-3    分子式：    C18H35NO    281.48    50mg