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RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸

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更新時間:2017-08-07 11:08:14瀏覽次數(shù):209次

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產(chǎn)地 進口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸
英文名稱:RDFsrat dermal fibroblasts
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0042
RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

4,TRAIL-R4 ELISA Kit
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL-R1 ELISA Kit
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISA Kit 
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA Kit 
人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit
人干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA Kit 
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit 
人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit 
人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒    進口/分裝    人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA Kit
人的神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Nerve growth factor,NGF ELISA Kit 
人巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA Kit 
人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA Kit 
人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒     進口/分裝    Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA Kit
人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA Kit 
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA Kit
人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA Kit 
人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA Kit
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit 
RDFs 大鼠真皮成纖維細胞保存運輸人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit 
人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit 
人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF ELISA Kit
人粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒    進口/分裝    Human 

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