*期 SDS-PAGE 上樣液1mL操作步驟詳細(xì)說明書：

*期 SDS-PAGE 上樣液1mL操作步驟產(chǎn)品及特點(diǎn)：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨(dú)配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍(lán)色，便于上樣時(shí)識(shí)別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實(shí)驗(yàn)。
*期 SDS-PAGE 上樣液1mL操作步驟對(duì)于組織樣品：
1. 把*切成細(xì)小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強(qiáng)烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
*期 SDS-PAGE 上樣液1mL操作步驟對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細(xì)胞 2.1 對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 2.2 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
β-葡聚糖酶500毫克

PIkit 1vial原裝/10vial原裝 Pharmacia17047201

β-奈硫脲，英文名或英文縮寫：2-Naphthylthiourea，級(jí)別：CP，97%，規(guī)格：500克

BAIRD-PARKER瓊脂基礎(chǔ) Bcird-Pcrkqr cgcr Bc

六本并本，英文名或英文縮寫：Coronene，級(jí)別：CP，規(guī)格：1克
透析袋7000HC1000u

2402-78-02,6-二錄;鄰二錄;2,6-二錄氮本2,6-Dichloropyridine

5-Bromo-2-xy7noxy-4-metxylpyridine 164513-38-6

鄰苯二單甲酯 mono-Methyl phthalate,97% 4376-18-5 10G 通用試劑

微生物測試培養(yǎng)瓊脂 Nc
ACRYL/BIS37.5:1,PREMIXEDPOWDER丙烯酰胺/甲叉 37.5:1粉末蛋白組學(xué)級(jí)40GRT

102-82-9三正丁胺Tributylamine

RNAGELLOADINGKITRNA膠上樣試劑盒0100 reactionsCOLD

1,4-二溴-2-苯 1,4-Dibromo-2-fluorobenzene,98% 1435-52-5 25G 通用試劑

聚乙二醇750單甲醚/聚乙二醇單甲醚/聚乙二醇甲醚/甲氧基聚乙二醇/MPEG 750 BR 100克 國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105)

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞RNAHUVSMC miRNA5 μg

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

TTR Others Human 人 Transthyretin / TTR / Prealbumin / PALB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞RNAHUVSMC miRNA5 μg

大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105)

恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2

KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

TTR Others Human 人 Transthyretin / TTR / Prealbumin / PALB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
*期 SDS-PAGE 上樣液1mL操作步驟EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77

STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

3T3/e細(xì)胞，小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞 人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μg

恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞