SDS-PAGE 預制膠12 塊操作步驟詳細說明書：

SDS-PAGE 預制膠12 塊操作步驟產品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
SDS-PAGE 預制膠12 塊操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
SDS-PAGE 預制膠12 塊操作步驟對于培養細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
FMOC-D-亮酸10克RT

Phosphatidylcholine 25mg/100mg/250mg Sigma P4279

嶙酸甲酯，英文名或英文縮寫：TMP，級別：試劑級，98%，規格：25克

肖醋鋇 BcriuM nitnctq 100-31-8

鉍鉛錫鎘合金，英文名或英文縮寫：Wood's metal，級別：AR，98%，規格：100克
吐混80，英文名或英文縮寫：Tween 80，級別：BR，99%，規格：100毫克

1398-61-4甲殼素;甲殼質;殼素;明角質;殼蛋白;殼多糖;幾丁質;聚乙酰基葡糖Chitin;Poly(N-acetyl-1,4-β-D-glucopyranosaMine;Poly-(1→4)-β-D-N-acetylglucosaMine

花寶1號，英文名或英文縮寫：N-P-K(7-6-19)，級別：超純，99%，規格：1KU

二甲基砜 Dimethyl sulfone,98% 67-71-0 100G 通用試劑

A-CHYMOTRYPSINα -*高純級白色結晶粉末FROZENsigma

4097-22-7地丹諾辛相關物質BDidanosine Related CoMpound B;2',3'-dideoxyadenosine

2-(Morpholinometxyl)pxenylboronic acid 223433-45-2

乙酸香蘭素酯 Vanillin acetate,≥98% 881-68-5 25G 通用試劑

糖元染液/糖原染液/PAS Stain 染色 40毫升 國產
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照)

人臍動脈平滑肌細胞HUASMC

大鼠食管上皮細胞*培養基 100mL

OVCAR-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
人臍動脈平滑肌細胞HUASMC

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠食管上皮細胞*培養基 100mL

OVCAR-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
SDS-PAGE 預制膠12 塊操作步驟LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細胞裂解液 (陽性對照)

ACHN, 人腎細胞腺癌細胞

GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

SW579細胞，人甲狀腺癌細胞 人鼻咽癌細胞系,HNE2-LMP1細胞 CL-0363Hs68(人男性正常細胞)5×106cells/瓶×2

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA

Sars結構蛋白表達株;293sars181A