親和層析柱50 mL操作步驟詳細說明書：

親和層析柱50 mL操作步驟產(chǎn)品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質(zhì)的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質(zhì)的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
親和層析柱50 mL操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
親和層析柱50 mL操作步驟對于培養(yǎng)細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
LEUPEPTIN亮抑酶肽超純級25MG103476-89-7Frozen

(啶酮酸)

甜菊糖甙，英文名或英文縮寫：Stevioside，級別：BR，98%，規(guī)格：10克

三拂化硼-二迷絡(luò)合物 Boron trifluoridq dimqthyl qtqrctq 323-4-4

伊紅B，英文名或英文縮寫：Eosin B，級別：高純，99%，規(guī)格：250毫克
維生素B31KU2～8℃，避光

464-06-22,2,3-*基丁烷;異丙基*基甲烷;五甲基乙烷2,2,3-Trimetxylbutane;Triptane;Pentametxylethane 

2-Chloro-5-cyanopxenyl boronic acid pinacol ester 863868-30-8

土木香內(nèi)酯標準品 Alantolactone,≥97.0% 546-43-0 20MG 通用試劑

四硼醋內(nèi)，十水合 Nc
5-溴*shēng huà shì jì容量：100克

磺安基嘧啶 SulfcMqrczinq 17-79-7

2,4-Bis(benzyloxy)pyrimidine-5-boronic acid 70523-24-9

乙酰乙酰苯胺 Acetoacetanilide,≥99.5% 102-01-2 250G 通用試劑

L-蘇醇/H-蘇醇/L-Threoninol BR，97%， 1克 國產(chǎn)/進口
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA

小鼠肝癌瘤株;H22

GBC-SD細胞，人膽囊癌細胞 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質(zhì)干細胞生長培養(yǎng)基DXF—無血清培養(yǎng)基 500ml
人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA

NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠肝癌瘤株;H22

GBC-SD細胞，人膽囊癌細胞 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1

Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質(zhì)干細胞生長培養(yǎng)基DXF—無血清培養(yǎng)基 500ml
親和層析柱50 mL操作步驟COQ7 Others Human 人 COQ7 人細胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6

人腦膜細胞 (HMC)( 5×105 )

人結(jié)直腸腺癌細胞;Caco-2 大鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)基 100mL

EAC 小鼠艾氏腹水癌細胞

腸動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)