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dCTP 溶液,100mM0.5mL保存

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更新時(shí)間:2017-07-17 13:16:20瀏覽次數(shù):152次

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dCTP 溶液,100mM0.5mL保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。

dCTP 溶液,100mM0.5mL保存產(chǎn)品及特點(diǎn):
易錯(cuò) PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫(kù)選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開(kāi)發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,十分簡(jiǎn)單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒(méi)有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見(jiàn)使用手冊(cè)疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡(jiǎn)單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn),則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物,對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴(kuò)增。
dCTP 溶液,100mM0.5mL保存變性溫度與時(shí)間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過(guò) 95 退火溫度與時(shí)間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng),但過(guò)高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
dCTP 溶液,100mM0.5mL保存DNA 擴(kuò)增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過(guò)低可造成引物與模板 錯(cuò)配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進(jìn)行推測(cè),一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時(shí)間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長(zhǎng)時(shí)間退火沒(méi)有必要。
dCTP 溶液,100mM0.5mL保存詳細(xì)說(shuō)明書(shū):

dCTP 溶液,100mM0.5mL保存使用方法:
1. 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見(jiàn)下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒(méi)有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見(jiàn)注) 72 1 分鐘注:易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng),也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 1 mg     9-oxo-11a15R-dihydroxy-16-phenoxy-17181920-tetranor-prosta-5Z13E-dien-1-oic acid 16-phenoxy tetranor PGE2 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2

Clorgyline hydrochloride 25 mg     N-2,4-Dichlorophenoxypropyl-N-methylpropargylamine N-[3-2,4-dichlorophenoxypropyl]-N-methyl-2-propyn-1-amine, monohydrochloride

氫氧化鈉(500GM     Sodium Hydroxide 1310-73-2 MW 40

Meloxicam 100 mg     4-hydroxy-2-methyl-N-5-methyl-2-thiazolyl-11-dioxide-2H-12-benzothi-3-carboxamide Coxicam|UH-AC 62XX Meloxicam

Sulpho NONOate 50 mg     disodium E-1-sulfonatodiazen-1-ium-12-diolate Sulpho NONOate

Radio-Immunoprecipitation Assay Buffer     RIPA Buffer
Xestospongin C 100 ug     [1R-1R4aR11R12aS13S16aS23R24aS]-eicosahydro-5H17H-123:1113-diethano-2H14H-[111]dioxacycloeicosino[23-b:1213-b1]dipyridine XeC|Araguspongine E Xestospongin C

Streptavidin:Eu-W1024 20 ug     Streptavidin:Eu-W1024

DAPT 25 mg     N-[2S-35-difluorophenylacetyl]-L-alanyl-2-phenyl-11-dimethylethyl ester-glycine GSI-IX DAPT

Silodosin 5 mg     KMD-3213 2,3-dihydro-1-3-hydroxypropyl-5-[2R-2-[[2-[2-2,2,2-trifluoroethoxyphenoxy]ethyl]amino]propyl]-1H-indole-7-carboxamide

JWH 081 4-hydroxynaphthyl metabolite 5 mg     4-hydroxy-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl-methanone JWH 081 4-hydroxynaphthyl metabolite

DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa     DiaEasy Dialyzer (3 ml) MWCO 6-8 kDa
Arachidonic Acid-d8 10 mg     5Z8Z11Z14Z-eicosatetraenoic-568911121415-d8 acid AA-d8 Arachidonic Acid-d8

PX 2 10 mg     FU-PX R-N-1-ami-oxo-3-pxenylpropan-2-yl-1-5-fluoropentyl-1H-indazole-3-carboxamide

鬼筆環(huán)肽-iFluor 647偶聯(lián)物     Phalloidin-iFluor 647 Conjugate

phospho-Linoleoyl Ethanolamide 1 mg     N-[2-phosphonooxyetxyl]-9Z12Z-octadecadienamide diwo7ium salt phospho-LEA phospho-Linoleoyl Ethanolamide

Oleoyl Ethanolamide 10 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z-octadecenamide OEA|Oleic Acid Ethanolamide Oleoyl Ethanolamide

Streptomycin sesquisulfate Streptomucn A     Streptomycin Sulfate
BYP瓊脂培養(yǎng)基250g用于巴氏桿菌分離培養(yǎng)

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 用于鑒別包括傷寒桿菌在內(nèi)的沙門氏菌 1000ml incubation media 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 用于鑒別包括傷寒桿菌在內(nèi)的沙門氏菌 1000ml

類芽孢桿菌 產(chǎn)葡萄糖*。 /

ECBroth

念珠菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于白色念珠菌分離和鑒定
CIN培養(yǎng)基250g用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)

改良BPLS瓊脂 BPLS AgarModified 用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))

3號(hào)膽鹽 Bile salt No. 3 25 BR90%

碎肉肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于厭氧菌特別是專性厭氧菌的培養(yǎng)、增菌和修復(fù),含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)incubationmedia碎肉肉湯基礎(chǔ)250g/瓶用于厭氧菌特別是專性厭氧菌的培養(yǎng)、增菌和修復(fù),含維生素K,需添加(庖肉牛肉粒)

A-1培養(yǎng)基 250g 用于水中糞大腸菌群檢測(cè)
dCTP 溶液,100mM0.5mL保存波爾頓選擇性增菌肉湯250g用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)

BacillusMegatheriumMedium

牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ) Oxford Agar Base 250 用于單增李氏菌的選擇性分離

甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂50g/瓶用于耐熱核酸酶試驗(yàn)incubationmedia甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂50g/瓶用于耐熱核酸酶試驗(yàn)

PhosphateBufferedSaline

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