Southern Marker DL2000( * )20 次*詳細介紹：

Southern Marker DL2000( * )20 次*產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點: 1. 一站式，含有電泳所需要的所有試劑，即開即用，十分方便，免去了 實驗人員稱取有毒物品。 2. 靈活，可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE，以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。 3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。 4. 使用新型緩沖液，可以防止甘油的干擾。
Southern Marker DL2000( * )20 次*使用方法：
一、準備工作
1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿（詳見該產品的使用手冊）。
2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍，得到 1X 電泳緩 沖液待用。
3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中，按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，搖晃致溶， 立即使用。注意：放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠
1. 估計所需要的凝膠溶液的體積，一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液，配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。
2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制：在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會溶解在這少量溶液中）。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積，在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分
4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右，直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后，將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣（氧氣會降低聚合反應效率）。但如果實驗條件有限，此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意：即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis，TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化，TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠，然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后，在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用，需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液，充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。
Southern Marker DL2000( * )20 次*后續處理：
1. 染色觀察：將凝膠一面的玻璃板揭開，直接用仍然附著在另一玻璃板上的 凝膠進行各種染色，包括銀染（固定、漂洗、顯影和定影等步驟）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天澤基因低毒核 酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下觀察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后進行膠回收處理。
3. Northern 雜交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下確定所需要的 miRNA 條帶的位置，切膠后電轉移到帶正電的尼龍膜上，然后進行雜交處理。
4. 放射自顯影：如果 miRNA 樣品電泳前經過同位素標記，則將凝膠一面的 玻璃板揭開，用濾紙將附著在另一玻璃板上的凝膠吸附過來，然后包上保 鮮膜，真空抽干，然后使膠跟 X 光片向對置進行放射自顯影。
人口腔角質細胞HOK

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照)

KMB17 人胚肺成纖維細胞

CM-H083人臍動脈內皮細胞*培養基100mL

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

人癌細胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細胞*培養基 100mL
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人結腸平滑肌細胞總RNAHCSMC tRNA

人關節軟骨細胞*培養基 100mL

Vero細胞，綠猴腎細胞 RSC96(大鼠雪旺細胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

U-937(人組織細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細胞;EL4
人結腸平滑肌細胞總RNAHCSMC tRNA

PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人關節軟骨細胞*培養基 100mL

Vero細胞，綠猴腎細胞 RSC96(大鼠雪旺細胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

U-937(人組織細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細胞;EL4
Anti-TFF2/FITC 熒光素標記三葉肽因子2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

ASCL1/MASH1(Achaete-scute homolog 1) 神經母細胞特異性轉移因子抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

心肌肌凝蛋白抗體 Anti-SM-MHC 0.2ml

SLAMF9 英文名稱： CD2F-10抗體 0.2ml

Endothelin 3 英文名稱： 內皮素3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MARCKS (Ser152/156) 磷酸化*蛋白激酶C底物Marcks抗體 規格 0.1ml

ASCL1/MASH1(Achaete-scute homolog 1) 神經母細胞特異性轉移因子抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg
Goat Anti-Mouse IgM/RBITC 羅丹明標記的羊抗小鼠IgM 0.3ml

AFF2 英文名稱： 脆性X綜合征相關蛋白AFF2抗體 0.2ml

CD25/白介素2-受體抗體 Anti-CD25/IL-2RA 0.1ml

Anti-p-Nrf2/FITC 熒光素標記磷酸化核因子2相關因子2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLGLB2 纖溶酶相關蛋白B2抗體 規格 0.2ml

Anti-CD8/PE 熒光素藻紅蛋白標記兔抗人、大、小鼠CD8抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml
Southern Marker DL2000( * )20 次*P-selectin 大鼠可溶性P-選擇素Multi-class antibodies規格： 48T

Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MYOM1 肌間蛋白1抗體 規格 0.2ml

SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型免疫球蛋白A 96T

Somatostatin 14 英文名稱： *14抗體 0.2ml

C2orf72 英文名稱： 2號染色體開放閱讀框72抗體 0.2ml

Anti-EGFR 表皮生長因子受體抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml