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骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2017-07-10 11:54:36瀏覽次數(shù):192次

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公司供應(yīng)的骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)品種類齊全,檢測(cè)效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白

大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

H-4-IL-E 大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-IL-E hepatoma cells of rats MEM90%(內(nèi)2mM Glutamin)+10%胎牛血清,補(bǔ)加非必須氨基酸(100x)

小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MM-prf

MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人淋巴細(xì)胞;1301

CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H009人支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SW480細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,MV3細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;Mao

HBL-100(人整合SV40基因的上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

AZU1 Others Human AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SMR3B Others Human SMR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO 癌細(xì)胞,ZR-75-30細(xì)胞 SVP細(xì)胞,VERO衍生株

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]

HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠亮酸豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)ELISA試劑盒 ,英文名: LGI3 ELISA Kit

人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanGlomerulartissueextract-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 96T/48T

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒 Rat plaet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit

英文名稱RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)規(guī)格:96T/48T

鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)利羅丁受體(ryanodinereceptor;RyR)功能熒光檢測(cè)試劑盒20

ELISAKitITGαM/CD11b人整合素αM型規(guī)格:48T/96T
人脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human midkine (MK) ELISA Kit 人中期因子(MK)ELISA試劑盒

Humannuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 人核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humanhypotheticalproteinLOC677340ELISA試劑盒人假定蛋白LOC677340ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20

Humanlipidperoxlde,LPOELISAKit人過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
骨組織蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說(shuō)明書(shū)大鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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