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產品名稱:線粒體/胞漿蛋白提取試劑盒50T免費代測
儲存條件: 線粒體試劑A和B于2-8℃保存,*存放于-20℃保存; 試劑C和D室溫保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。
有效期:一年。
產品簡介:
線粒體蛋白/胞漿蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種原代或傳代細胞和各種實體組織,如腦、脊髓、神經結或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結締組織等哺乳動物組織中提取線粒體蛋白和胞漿蛋白。提取過程簡單方便。制備的線粒體蛋白不僅純度高,保持天然活性,而且絕少交叉污染。
線粒體/胞漿蛋白提取試劑盒50T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
線粒體/胞漿蛋白提取試劑盒50T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
線粒體/胞漿蛋白提取試劑盒50T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
正尾葉香茶菜Rabdosia excisa Sventenic acid (4BETA,7BETA)-7-羥基貝殼杉-16-烯-18-酸 126778-79-8 C20H30O3 ≥95%
槲皮速QuqrcqtinHPLC≥98%,20mg/支
*E;葫蘆苦素 E Cucurbitacin E 18444-66-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
HPLC法含量測定利拉酯100791-200501常溫,避光100mg
Benzyl Alcohol本標準品100-51-6500mg
22071-15-4 *標準品 200mg
高香草醋Homovanillicacid306-08-120mg
Catalposide 梓苷 6736-85-2
(α+β~2+1)標準品 號: 250mg
對羥基肉桂酸;p-xy7noxy-cin 7400-08-0 20mg 訂購|咨詢
牛磺膽酸鈉 wo7ium taurocholate 145-42-6 20mg
異去蟛蜞菊內酯Gotoawedelolactone6468-22-920mg
Forskolin J 毛喉帖 J 81873-08-7
Monoethanolamine 乙醇胺標準品141-43-5 1ml乙醇胺標準品
山姜素;Alpinetin 36052-37-6 20mg 訂購|咨詢
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*測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
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