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細(xì)胞凋亡檢測(cè)形態(tài)特征

時(shí)間:2018-4-9閱讀:107
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細(xì)胞凋亡檢測(cè)根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學(xué)意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個(gè)體和生存中起著非常重要的作用。它是細(xì)胞在一定生理?xiàng)l件下一系列順序發(fā)生事件的組合,是細(xì)胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過程。細(xì)胞凋亡具有可鑒別的形態(tài)學(xué)和生物化學(xué)特征。
在形態(tài)上可見凋亡細(xì)胞與周圍細(xì)胞脫離接觸,細(xì)胞變園,細(xì)胞膜向內(nèi)皺縮、胞漿濃縮、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張、細(xì)胞核固縮破裂呈團(tuán)塊狀或新月狀分布、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細(xì)胞膜進(jìn)一步融合將細(xì)胞分成多個(gè)完整包裹的凋亡小體,凋亡小體后被吞噬細(xì)胞吞噬消化。在凋亡過程中細(xì)胞內(nèi)容物并不釋放到細(xì)胞外,不會(huì)影響其它細(xì)胞,因而不引起炎癥反應(yīng)。
在生物化學(xué)上,多數(shù)細(xì)胞凋亡的過程中,內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶活化,活性增加。核DNA隨機(jī)地在核小體的連接部位被酶切斷,降解為180-200bp或它的整倍數(shù)的各種片斷。如果對(duì)核DNA進(jìn)行瓊脂糖電泳,可顯示以180-200bp為基數(shù)的DNA ladder(梯狀帶紋)的特征。
相比之下,壞死是細(xì)胞處于劇烈損傷條件下發(fā)生的細(xì)胞死亡。細(xì)胞在壞死早期即喪失質(zhì)膜完整性,各種細(xì)胞器膨脹,進(jìn)而質(zhì)膜崩解釋放出其中的內(nèi)容物,引起炎癥反應(yīng),壞死過程中細(xì)胞核DNA雖也降解,但由于存在各種長(zhǎng)度不等的DNA,不能形成梯狀帶紋,而呈彌散狀。
一些溫和的損傷刺激及一些抗腫瘤藥物可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,通常這些因素在誘導(dǎo)凋亡的同時(shí),也可產(chǎn)生細(xì)胞壞死,這取決于損傷的劇烈程度和細(xì)胞本身對(duì)刺激的敏感程度。
三尖杉酯堿(HT)是我國(guó)自行研制的一種對(duì)急性粒細(xì)胞白血病,急性單核白血病等有良好療效的抗腫瘤藥物。研究表明HT在0.02~5μg/ml范圍內(nèi)作用2小時(shí),即可誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡,細(xì)胞凋亡檢測(cè)表現(xiàn)出典型的凋亡特征。本實(shí)驗(yàn)用1μg/ml HT在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的HL-60細(xì)胞發(fā)生凋亡,同時(shí)也有少數(shù)細(xì)胞發(fā)生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行雙重染色,可以區(qū)別凋亡、壞死及正常細(xì)胞。
Dibucaine Hydrochloride    500mg    鹽酸地布卡因標(biāo)準(zhǔn)品    1961/12/1
Dibutyl Phthalate    200mg    鄰苯二甲酸二丁酯標(biāo)準(zhǔn)品    84-74-2
Dibutyl Sebacate (AS)    1ml    癸二酸二丁酯標(biāo)準(zhǔn)品    109-43-3
Dichloralphenazone CIV    200mg    氯醛比林標(biāo)準(zhǔn)品    480-30-8
Dichlorphenamide    200mg    雙氯非那胺標(biāo)準(zhǔn)品    120-97-8
Diclazuril    200mg    地克珠利標(biāo)準(zhǔn)品    101831-37-2
Diclofenac Potassium    200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品    15307-81-0
Diclofenac Sodium    200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品    15307-79-6
Dicloxacillin Sodium    500mg    *鈉標(biāo)準(zhǔn)品    13412-64-1
細(xì)胞凋亡檢測(cè)

 

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