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海洋微生物菌種操作方法

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海洋微生物菌種操作方法
1、直接法免疫血清的制備
取體重2~3Kg的雄雞1只,免疫前采血8~10mL,測其正常抗體。靜脈注射新城疫弱毒新鮮尿囊液病毒2mL,同時腹腔注射8mL,2~4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天試血,血清凝集價在1︰320以上為合格即可全采血;如果不合格,可在第二次免疫后10d左右,用同法再免疫一次,一般都可獲得價的免疫血清。制備抗病血血清時。抗原量要大,間隔日期要短。
2、免疫球蛋白抗血清制備方法
此法用于制備間接法抗抗體。因抗原為可溶性,故多需加佐劑。
(1)淋巴結注射法
1)選擇體重2~3Kg的健康雄性家兔( 2只以上),編號;
2)在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗,50mg(約0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮內0.2mL)。7~10d后,鼠或國窩處淋巴結腫大如黃豆或蠶豆大小;
3)用二指固定腫大之淋巴結,兩側淋巴結各注射加有*佐劑的抗原o.5mL,共1mL。事先將抗原稀釋為 5~10mg/ml,在免疫前一日加入青、*,使青、*的濃度分別為1000U/mL和1000mg/mL。4℃過夜,次日取出與佐劑混合成乳劑。許多單位用兩個注射器分別吸取佐劑與抗原,中間用細膠管連接,相互推進若干次,達到乳化目的;
4)10~14d后,于兩側淋巴結各注射加有*佐劑的抗原0.25~0.5mL(這一次也可以省略);
5)7d后,于兩側淋巴結各注射加有不*佐劑的抗原0.25~0.5mL;
6)試血:第三次免疫后7~10d,耳靜脈取少量血,分離血清,用雙擴散法,中間孔加抗原(1mg/mL),周圍孔加不同稀釋度的待檢抗血清,37℃、 24h,觀察結果,效價在1︰16以上,或者中間孔加抗血清,周圍孔加不同稀釋倍數的抗原。效價達4000倍以上即可應用;
7)放血:效價合格后即可放血。放血前停食12h。動物仰臥固定,頸部剪毛消毒,切開皮膚lOcm,找到頸動脈,將頸動脈和迷走神經剝離。選擇血管中段,用兩*夾住(約 5cm),切開,放血(2500g重家兔可放血lOOmL);
8)分離血清:血液放于大試管、平皿或三角瓶中,凝固后,用鉑耳或無菌滴管沿邊緣剝離,先故37122h,再放4℃過夜,使血清充分析出。離心沉淀,鑒定合格,冰箱保存備用。、
海洋微生物菌種小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA Kit    英文名:    Mouse Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase, pAMPK ELISA Kit
小鼠磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA Kit    英文名:    Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit
小鼠磷酸化*蛋白激酶JAK3(pJAK3)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphorylated tyrosine-protein kinase JAK3,pJAK3 ELISA kit
小鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA Kit    英文名:    Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit
小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphorylated protein kinase B,P-PKB ELISA Kit
小鼠磷酸化表皮生長因子受體(pEGFR)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR ELISA kit
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA Kit    英文名:    Mouse phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,P-JNK ELISA kit
小鼠*腦啡肽(Leu-ENK)ELISA Kit    英文名:    Mouse Leu-Enkephalin,Leu-ENK ELISA Kit
小鼠鏈球菌(SK)抗體(IgG)ELISA Kit    英文名:    Mouse streptococcal(SK)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠*羥化酶(TH)ELISA Kit    英文名:    Mouse tyrosine hydroxylase,TH ELISA Kit
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)ELISA Kit    英文名:    Mouse Transmembrane protein 97,TMEM97/MAC30 ELISA Kit
小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA Kit    英文名:    Mouse soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA KIT
小鼠可溶性血栓調節蛋白(sTM)ELISA Kit    英文名:    Mouse Soluable Thrombomodulin,sTM ELISA Kit
小鼠可溶性髓系細胞觸發受體-1(sTREM-1)ELISA Kit    英文名:    Mouse sTREM-1 ELISA Kit
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA Kit    英文名:    Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit
小鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA Kit    英文名:    Mouse soluble Lectin-like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor-1(sLOX-1)ELISA Kit
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA Kit    英文名:    Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA Kit    英文名:    Mouse soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit海洋微生物菌種

 

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