生物菌種實驗經驗總結
1、包被原的性質很重要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不可以被其識別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時，師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對于*和脂類物質或小分子物質我們要事先對其改造再加以包被，我把方法簡要的列出如下:①親和素*:先親和素先包被載體，加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。②脂類物質:可將其在有機溶劑(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發后，讓脂質自然干固在固相表面。③小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯后才能固定在固相載體上。
2、包被液的選擇，一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。應注意以下原理：由于蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
3、封閉：繼包被之后用高濃度的無關蛋白質溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關的蛋白質充填這些空隙，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉，比較價廉，可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。但zui終選用什么，要依據試驗具體來實踐。
生物菌種人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒    Human Bradykinin,BK ELISA Kit
人血管生成抑制因子(Arresten)免疫試劑盒    Human Arresten ELISA Kit
人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)免疫試劑盒    Human ANGPTL4 ELISA kit
人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)免疫試劑盒    Human ANGPTL3 ELISA Kit
人血管生成素4(ANG-4)免疫試劑盒    Human Angiopoietin 4 ELISA Kit
人血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒    Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
人血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒    Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit
人血管生長素(ANG)免疫試劑盒    Human Angiogenin,ANG ELISA Kit
人血管內皮抑素抗體(ES-Ab)免疫試劑盒    Human anti-Endostatin antibody,ES-Ab ELISA Kit
人血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒    Human VCAM-1 ELISA kit
人血管內皮細胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒    Human VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit
人血管內皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒    Human VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit
人血管內皮細胞生長因子E(VEGF-E)免疫試劑盒    Human vascular endothelial cell growth factor E,VEGF-E ELISA Kit
人血管內皮細胞生長因子(VEGF165)免疫試劑盒    Human vascular endothelial cell growth factor,VEGF165 ELISA Kit
人血管內皮生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)免疫試劑盒    Human vascular endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA kit
人血管內皮生長因子121(VEGF121)免疫試劑盒    Human Vascular Endothelial Growth Factor 121,VEGF121 ELISA kit
人血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)免疫試劑盒    Human VE-cad ELISA Kit
人血管緊張素轉化酶2(ACE2)免疫試劑盒    Human Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
人血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒    Human aGT ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)免疫試劑盒    Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 antibody,AT2R-Ab ELISA Kit
人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)免疫試劑盒    Human AT2R ELISA Kit生物菌種