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賽默飛色譜及痕量元素分析

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賽默飛色譜柱嚴(yán)重拖尾該如何處理?

閱讀:888      發(fā)布時間:2022-12-16
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  出峰快結(jié)束的時候又出來一個不全的峰,對于這種情況,很有可能是你的柱子不干凈,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩(wěn)定。
 
  賽默飛色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴(yán)重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質(zhì)匹配。我經(jīng)常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。
 
  拖尾原 因 解決方法
 
  1、篩板阻塞 1、a、反沖色譜柱 b、更換進(jìn)口篩板 c、更換色譜柱
 
  2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱
 
  3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱
 
  4、流動相PH選擇錯誤 4、調(diào)整PH值。對于堿性化合物,低PH值更有利于得到對稱峰
 
  5、樣品與填料表面的溶化點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)圖 5、a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑 b、更改色譜柱
 
  F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
 
  原 因 解決方法
 
  1、柱外效應(yīng) 1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接(使用更短、內(nèi)徑更小的管路) b、使用小體積的流通池
 
  G、 K’增加時,脫尾更嚴(yán)重
 
  原 因 解決方法
 
  1、二級保留效應(yīng),反相模式 1、a、加入三乙胺(或堿性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩沖劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子
 
  2、二級保留效應(yīng),正相模式 2、a、加入三乙胺(或堿性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團(tuán)化合物) d、試用另一種方法
 
  3、二級保留效應(yīng),離子對 3、加入三乙胺(或堿性樣品)
 
  H、 酸性或堿性化合物的峰拖尾
 
  原 因 解決方法
 
  1、緩沖不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液 b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液
 
  I、 額外的峰
 
  原 因 解決方法
 
  1、樣品中有其他組份 1、正常
 
  2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰 2、a、增加運(yùn)行時間或梯度斜率 b、提高流速
 
  3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純凈 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進(jìn)樣體積
 

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