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上海莼試生物技術有限公司
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EPI300 電擊感受態細胞 50ul*20-生命科學儀器

參   考   價: 1000

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2019-09-20 16:15:30瀏覽次數:229次

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EPI300 電擊感受態細胞 50ul*20運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產品名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產品僅用于科研

產品名稱EPI300 電擊感受態細胞 50ul*20
包裝50ul*20
分類克隆感受態細胞

培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

 

shēng huà shì jì 微量可調移液器P2 容量: 保存:-20℃ 100毫克

shēng huà shì jì 微量可調移液器P1000 容量: 25克

shēng huà shì jì 微量可調移液器P100 容量: 保存:-20℃ 1克

shēng huà shì jì 微量可調移液器P10 容量: 保存:-20℃ 1克

shēng huà shì jì 微量可調八道移液器P50 容量: 保存:-20℃ 1克

shēng huà shì jì 微量可調八道移液器P300 容量: 保存:-20℃ 250毫克

shēng huà shì jì 微量可調八道移液器P10 容量: 2~8℃ 1克

shēng huà shì jì 微孔濾膜(混纖) 容量: 保存:-20℃ 25毫克

shēng huà shì jì 微晶纖維素板 容量: 2~8℃ 1克

shēng huà shì jì 微晶纖維素 容量: 100克

shēng huà shì jì 網織紅細胞計數液 容量: 1公斤

shēng huà shì jì 王樹脂 容量: 25克

shēng huà shì jì *培養基 容量: 2~8℃ 25毫升

shēng huà shì jì 彎曲菌血瓊脂基礎 容量: RT 支

EPI300 電擊感受態細胞 50ul*20shēng huà shì jì 唾液酸測試盒(帶SA標準) 容量

大鼠乙酰* 規格: 48T/96T

 ALDH 大鼠乙醛脫氫酶 規格: 48T/96T

 ADH 大鼠乙醇脫氫酶 規格: 48T/96T

 Glp-1 大鼠胰高血糖素樣肽1 規格: 48T/96T

 Amylin 大鼠胰淀素 規格: 48T/96T

 ICA 大鼠胰島細胞抗體 規格: 48T/96T

 IAA 大鼠胰島素自身抗體 規格: 48T/96T

 PI 大鼠胰島素原 規格: 48T/96T

 IGFBP-4 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4 規格: 48T/96T

 IGFBP-3 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白3 規格: 48T/96T

 IGFBP-2 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2 規格: 48T/96T

 IGFBP-1 大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1 規格: 48T/96T

 IGF-2 大鼠胰島素樣生長因子2 規格: 48T/96T

 IGF-1 大鼠胰島素樣生長因子1 規格: 48T/96T

 ISR-β 大鼠胰島素受體β 規格: 48T/96T

 INS 大鼠胰島素 規格: 48T/96T

 TAP 大鼠*原激活肽 規格: 48T/96T

: RT 個

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100        μl感受態細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
 5.根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12-16小時。

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