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其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)條件選擇的重要性

時(shí)間:2018/4/10閱讀:145
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其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的Z適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值Z大而蛋白量Z少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml.
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。
檢查    100mg    171254-200401    2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮
檢查    100mg    171254-200401    *雜質(zhì)B
鑒別    100mg    171256-200401    鹽酸*
有關(guān)物質(zhì)    50mg/支    171267-201001    2-氨基-5-硝基二苯酮
有關(guān)物質(zhì)    50mg/支    171267-201001    *雜質(zhì)
有關(guān)物質(zhì)    50mg/支    171268-201001    2-氨基-5-氯二苯酮
有關(guān)物質(zhì)    50mg/支    171268-201001    氯氮卓雜質(zhì)Ⅰ
有關(guān)物質(zhì)    20mg    171270-201001    N-脫烷基西泮
有關(guān)物質(zhì)    20mg    171270-201001    *雜質(zhì)
其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒

 

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