ELISA試劑盒沒有吸光度值或吸光度值很低
或許致使的要素有試劑盒已過有效期、運(yùn)用的試劑盒內(nèi)容物不是同一個(gè)批次的、沒參加酶符號物、試劑盒的內(nèi)容物沒有充沛的回溫、孵育的溫度太低一級,相對應(yīng)的處理辦法是
更換成在有效期以內(nèi)的試劑盒、運(yùn)用同~個(gè)批次的試劑盒的內(nèi)容物、依照試劑盒闡明書中的進(jìn)程進(jìn)行操作、將試劑盒的內(nèi)容物充沛的回溫后再進(jìn)行操作、在實(shí)驗(yàn)操作的悉數(shù)進(jìn)程中請仔細(xì)觀察恒溫箱的溫度。
ELISA試劑盒吸光度值偏高
或許致使的要素有孵育的溫度過高、反響的時(shí)刻過長。相對應(yīng)的處理辦法是調(diào)整孵育環(huán)境的溫度,如無法調(diào)整室內(nèi)的溫度,請將顯色時(shí)刻恰當(dāng)?shù)目s短、操控反響時(shí)刻。
規(guī)范曲線的線性欠好,或平行性欠好(雙孔對照孔的OD值差別很大),或呈現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或許致使的要素有酶標(biāo)板孔間相互污染、洗板后未能從速進(jìn)行下一步操作、增加樣品或其它試劑時(shí)操作的辦法不對、孵育方位避光性欠安或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標(biāo)板孔問參加的試劑量不一樣,相對應(yīng)的處理辦法是加樣時(shí)請留神勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時(shí)也請留神,勿將洗刷液濺人另一微孔中、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、增加試劑時(shí)請懸空滴入,緊記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi),羅致不一樣試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次槍頭、招認(rèn)孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、運(yùn)用已校正過的微量加樣器,如將初度參加液體時(shí)槍頭上留有一滴的液體滴下,那么將往后槍頭上留有的液體也滴下,以確保參加液體體積的一致性。
ELISA試劑盒陰性樣本的吸光度值低
于陽性吸光度值或許致使的要素是呈現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或酶標(biāo)板孔中的試劑未充沛的混合。處理的辦法是留神操作的辦法,留神洗刷時(shí)的辦法、加完試劑后可將酶標(biāo)板在桌子上平行悄悄晃動30s,混勻液體。