一、ELISA試劑盒檢測(cè)動(dòng)物記憶獲得過程
1. 建立記憶獲得障礙模型:
在動(dòng)物進(jìn)行電擊訓(xùn)練之前15-20分鐘,給動(dòng)物腹腔注射*(*能M受體拮抗劑,HBr-Scopalamine),小鼠:3mg/kg,可見給藥組動(dòng)物出現(xiàn)探究行為,訓(xùn)練時(shí)在明室內(nèi)駐留時(shí)間略長(zhǎng)于對(duì)照組,進(jìn)入暗室后受到電刺激時(shí)的反應(yīng)與對(duì)照組相似:嘶叫或跳躍。24小時(shí)后當(dāng)再次將動(dòng)物放入明室時(shí),動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期顯著低于對(duì)照組,即制備成功記憶障礙模型。
2. 待測(cè)藥物的服用:
根據(jù)待檢測(cè)藥物在動(dòng)物體內(nèi)的作用高峰時(shí)間,于相應(yīng)時(shí)間給動(dòng)物服藥,如口服藥物,可于訓(xùn)練前1小時(shí)給動(dòng)物灌服待檢測(cè)藥物,然后再于訓(xùn)練前15-20分鐘給動(dòng)物損傷記憶獲得的藥物,如*等。
二、ELISA試劑盒記憶鞏固過程
1. 建立記憶鞏固障礙模型:
動(dòng)物電擊訓(xùn)練結(jié)束后立即給動(dòng)物腹腔注射蛋白質(zhì)合成抑制劑環(huán)己酰亞胺(Cycloheximide,小鼠:90-100mg/kg)抑制蛋白質(zhì)合成,或皮下注射NaNO2(小鼠:120mg/kg)導(dǎo)致動(dòng)物短暫性缺氧,或給動(dòng)物施行頭部瞬間電休克。然后放回飼養(yǎng)盒內(nèi),24小時(shí)后重測(cè)試。
2. 待測(cè)藥物的服用:
若是口服藥物,于電擊訓(xùn)練前藥物作用高峰期(一般選1小時(shí)前)給動(dòng)物灌服藥物。若是腹腔注射藥物,一般于訓(xùn)練前半小時(shí)注射。然后給動(dòng)物電擊訓(xùn)練,訓(xùn)練后立即給損傷記憶鞏固藥物或其它實(shí)驗(yàn)因素,24小時(shí)后重測(cè)試,可ELISA試劑盒檢測(cè)認(rèn)知藥物對(duì)記憶鞏固障礙的對(duì)抗作用。
三、記憶再現(xiàn)過程
1. 建立記憶再現(xiàn)障礙模型
于動(dòng)物重測(cè)試之前15分鐘給小鼠灌服酒精(35%,0.1ml/10g鼠重),15分鐘后進(jìn)行重測(cè)試。可見小鼠記憶提取過程受到損傷。
2. 待測(cè)藥物的服用:于動(dòng)物重測(cè)試之前1小時(shí)給動(dòng)物口服待檢藥物。
注意:
ELISA試劑盒該損傷只有在重測(cè)*-30分鐘灌胃酒精才起作用, 時(shí)間長(zhǎng)于30分鐘則無效。
該劑量酒精只對(duì)較不鞏固、一次性記憶有損傷作用,而對(duì)小鼠需經(jīng)多次訓(xùn)練而獲得的較鞏固的記憶的再現(xiàn)無影響。