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技術文章

如何有效避免ELISA試劑盒的實驗誤差

閱讀:160發布時間:2018-1-4

ELISA試劑盒查驗技師應具有從事試驗室操作的基本素質和實踐經驗。
能嫻熟操作試驗儀器、器械,具有必定總結和剖析疑問的才調,對試驗中呈現的意外情況能及時妥善處理。
怎么減小ELISA試驗中的過錯呢?要從天然要素(試劑安穩性、率、儀器精密度)和人為要素(操作者)兩個方面下手:
運用校對過的微量移液器,打掃天然過錯。移液器與否對定量檢查尤為首要。
值得改善的本地,重復試驗斷定建立后才調改善,比如洗板次數的把握等。
加樣要、敏捷。化學理論標明,生成物的量與反響物的量成正有關。
評估試劑的實用性。
試劑的安穩與否,對率的凹凸到頭首要。
ELISA試劑盒試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復對比試驗,斷定試劑契合央求后方可運用。
操作前仔細閱讀說明書。
嚴峻依照說明書央求進行規范化操作。
ELISA試劑盒不一樣批號的試劑不行混用。
加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色作用。
顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和間斷液的量有關,所以加樣應慎重。
央求在必定時刻內加樣結束的試驗,如果加樣緩慢,便呈現過錯,并且試劑長期顯露在外,特別室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
顯色時刻過短,參加間斷液反響間斷后,底物聯絡物的量過少,易呈現假陰性。
逾越顯色央求時刻后顯色,應判為假陽性,這或許與試劑自身有關。
洗板不*,酶聯絡物本底顯色會呈現假陽性。
洗刷液要新鮮,現用現配,陳腐的洗刷液會呈現本底增高現象,也或許呈現假陽性。
嚴控反響時刻。
反響時刻過長,酶失活;反響時刻過短,酶聯絡物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛聯絡,生成物構造懈怠不強健,簡略洗掉,都或許構成假陰性。
嚴峻把握顯色時刻。
加顯色劑后當即顯色,不行報陽性,這或許是本底顯色的作用。
ELISA試劑盒留神試劑保存期,過保存期的試劑不能運用。

 


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