一抗的挑選關鍵和技巧:
(1)單克隆和多克隆抗體的挑選。由一種克隆發生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能方針明確地與單一的特異抗原決定簇結合,就像dao彈地射中方針一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也能夠由好幾種克隆來發生抗體,構成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反響中,一般單克隆抗體特異性強,但親和力相對小,檢測抗原靈敏度相對就低;而多克隆抗體特異性稍弱,但抗體的親和力強,靈敏度高,但易呈現非特異性染色(能夠經過關閉等防止)。
(2)使用規模的挑選。有的一抗只能用于Westernblotting,或免疫組化、免疫熒光、免疫沉淀等;乃至標明白臘切片或冰凍切片。
(3)種屬反響性的挑選。這一點很重要,標明這種抗體可能存在種屬差異,且這種抗體合適檢測哪種種屬動物體內的抗原。
(4)種屬來歷,一般兔來歷的多是多克隆;而小鼠來歷的多是單克隆,但也有別的。根據此來歷來挑選相應的二抗。
(5)生產廠家的挑選。不同廠家的同一種抗體它的實踐效價,穩定是不同的。