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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件

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更新時間：2017-04-06 11:53:10瀏覽次數(shù)：133次

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上海一研生物科研有限公司

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產(chǎn)品簡介

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件采用干冰保存運輸。收到細(xì)胞時，若干冰已經(jīng)*融化，請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件
形態(tài)特性淋巴母細(xì)胞樣

生長特性懸浮生長

特征特性該細(xì)胞來源于一女性慢性粒細(xì)胞白血病患者的外周血。1994年由*昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況 P5

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　

支原體檢測熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限    A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
CSF2    Protein   Mouse   重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF2    Protein   Mouse   重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSF1    Protein   Mouse   重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF2    Protein   Human   重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF1    Protein   Human   重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSF3    Protein   Human   重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)
CSF3R    Protein   Human   重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSF3    Protein   Human   重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CSF2    Protein   Human   重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EFNA4    Protein   Human   重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EFNB2    Protein   Canine   重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EFNB2    Protein   Human   重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白
oxymatrine 氧化*;* 16837-52-8 264.36 C15H24N2O2梓Catalpa ovata     9-Methoxy-α-lapachone     9-甲氧基-ALPHA-拉帕醌     35241-80-6     C16H16O4     ≥95%
百合科植物知母 (Anemarrhena asphadeloides Bge)的干燥根莖     Isomangiferin      異芒果苷     24699-16-9     C19H18O11     ≥98%甜葉菊Stevia Rebaudiana Bertonl     Rebaudioside D     萊苞迪甙D     63279-13-0     C50H80O28     ≥98%
28-demethyl -β-amyrone 28-去甲基-β-香樹脂酮 73493-60-4    藍(lán)桉Eucalyptus globulus     3β-Hydroxyurs-11-en-28,13-olide     3-羥基-11-烏蘇烯-28,13-內(nèi)酯     35959-05-8     C30H46O3     ≥98%
地榆Sanguisorba officinalis     Songoroside A     *-3-O-BETA-D-氧基吡喃木糖苷     61617-29-6     C35H56O7     ≥95%(24R)-3β-[6-O-(β-D-Glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyloxy]-24-[2-O,6-O-bis(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyloxy]25-hydroxycucurbita-5-ene-11-on
綿棗兒Scilla scilloides     2-Hydroxy-7-O-methylscillascillin     2-羥基-7-O-甲基綿棗兒素     52096-50-1     C18H14O7     ≥95%Timosaponin B II 知母皂苷B2;知母皂苷BII 136656-07-0 921. C45H76O19
刺五加 Manyprickle Acanthopanax Root     2”-O-Galloylhyperin     2”-O-沒食子酰基金絲桃甙     53209-27-1     C28H24O16     ≥98%80286-58-4 青蒿酸 Artemisinic acid 234.33398 C15H22O2
地榆Sanguisorba officinalis     Pomolic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester     28-O-beta-D-吡喃葡萄糖果樹酸酯     83725-24-0     C36H58O9     ≥95%雞骨常山Alstonia yunnanensis     Picraline     匹克拉林堿     2671-32-1     C23H26N2O5     ≥95%
黃芩 Scularia baicalensis Georgi     Wogonoside     漢*     51059-44-0     C22H20O11     ≥98%b-D-Glucopyranoside, (3b,12b,20R)-12,20-dihydroxydammar-24-en-3-yl (R型)人參皂苷Rh2 112246-15-8 622.87268 C36H62O8
Ginsenoside F2 人參皂苷F2 62025-49-4 785.01328 C42H72O13Rebaudioside C 萊苞迪甙C;萊苞迪苷C 63550-99-2 951. C44H70O22
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9402培養(yǎng)條件人參Panax ginseng C.A.Mey     Ginsenoside RK3     人參皂苷RK3     364779-15-7           ≥98%28608-75-5 葒草苷 Orientin 448.38 C21H20O11
狹翅獨活Heracleum stenopterum     8-Geranyloxypsoralen     8-香葉草氧基補骨脂素     7437-55-0     C21H22O4     ≥98%動物器官組織Animal organ     Diethylstilbestrol     *     56-53-1     C18H20O2     ≥98%
木犀草 Resedaodorata L     Luteolin     木犀草素     491-70-3     C15H10O6     ≥98%枸橘Poncirus trifoliata (L.)     Methylisopelletierine     甲基異石榴皮堿     18747-42-7     C9H17NO     ≥98%
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