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技術文章

進口原裝elisa試劑盒標準的操作步驟

閱讀:273發布時間:2017-6-8

1.進口原裝elisa試劑盒加樣
加樣時應將所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。
2保溫
在建立ELISA 方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2 小時,產物的生成可達。為避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。由于公司的試劑盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會造成值偏高或花板。另外溫育中還有邊緣效應,邊上的值會偏高,建議為了客觀的判斷結果,將質控放在非邊緣位置。
3洗滌
洗滌在ELISA 過程中雖不是一個反應步驟,但卻決定著實驗的成敗。ELSIA 就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA 操作中,洗滌是zui主要的關鍵技術,應引起操作者的高度重視,操作者應嚴格按要求洗滌,不得馬虎。
洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質與固相載體的結合,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀態,從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
洗板時注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋,應按要求稀釋,所用的水電導率在1.5us/cm 之下,洗液如果結晶應待其融解后配制。保證洗板浸泡時間為40 秒左右,孔內液體被洗板機吸收得越干凈洗滌效果更好,進口原裝elisa試劑盒手工洗板防止洗液在孔內形成氣泡。
人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒    進口/原裝    英文名稱:    Human beta2 glycoprotein,β2-GP ELISA Kit    規格:    96T/48T
人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human α Lactalbumin,α-La ELISA Kit    規格:    96T/48T
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit    規格:    96T/48T
人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒    進口/分裝    英文名稱:    Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit    規格:    96T/48T
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒    進口/原裝    英文名稱:    Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit    規格:    96T/48T
人結蛋白(Des)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human desmin,Des ELISA Kit    規格:    96T/48T
人S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒    *    英文名稱:    Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit    規格:    96T/48T
人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒    進口/分裝    英文名稱:    Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit    規格:    96T/48T
人β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒    進口/原裝    英文名稱:    human Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit    規格:    96T/48T進口原裝elisa試劑盒

 


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