1.進口elisa試劑盒酶標抗體的活性鑒定 一般以瓊脂擴散和免疫電泳進行鑒定。使酶標抗體和相應的抗原(抗原濃度為1mg/ml)產生沉淀線,洗滌后于底物溶液中顯色,顯色后用鹽水漂洗,沉淀線不褪色,說明酶和抗體都具有活性。良好的酶標結合物瓊脂擴散滴度一般應在1:16以上。
2.進口elisa試劑盒酶結合物的定量測定 包括酶量、IgG含量、酶與IgG克分子比值以及結合率的測定。
酶量(µg/ml)=OD403nm×0.42
(1)戊二醛法:IgG(mg/ml)=(OD280nm-OD403nm×0.42)×0.94×0.62
(OD403×0.42為酶在403nm的光密度,抗體與酶-戊二醛結合后OD280nm約增加6%,所以乘以0.94校正。由于兔IgGOD280nm=1.0時為0.62mg,所以又乘以0.62)。
(2)過碘酸鈉法:IgG(mg/ml)=(OD280-OD403×0.30)×0.62
(3)進口elisa試劑盒克分子比值=(酶ug/m) /40000/