仔細閱讀其它elisa試劑盒說明書嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。
洗滌*
洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
嚴控反應時間
反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
注意ELISA試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。
評估試劑的實用性
試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗。
顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
加樣要準確、快速
如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且其它elisa試劑盒試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。
10升 DMEM 高糖,含丙酮酸鈉和* DME培養基
250 Peptone from Casein 干酪素*水解而成,培養基原材料 酪蛋白胨
50毫升 Egg-Yolk Polymyxin B Solution *卵黃多粘菌素瓊脂基礎配套試劑 卵黃*溶液
250克 Tetracyline Examination Agar 副溶血性弧菌的選擇性分離培養 四環素檢定瓊脂
250克 Halophilic Bacteria Selective Agar 副溶血性弧菌的選擇性分離培養 嗜鹽菌選擇性瓊脂
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