IL-2Relisa試劑盒在醫學實驗中常需動物的全身抗凝,采出的全血或血漿有的也需加入適當的抗凝劑抗凝。對抗凝劑的要求是:用量少、溶解度大、不帶進干擾實驗的雜質。實驗室里面zui常使用的抗凝劑為“肝素"。在此為您詳細介紹肝素抗凝作用原理以及詳細的配置方法及用量。
(1)肝素抗凝作用原理
肝素的抗凝作用很強,作死亡復蘇等實驗時,常用它作動物全身抗凝劑,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗*等作用,從而使血液不發生凝固。
注意事項:做全血DNA提取的時候抗凝劑不能采用肝素!因為肝素是聚合酶鏈式反應的抑制劑!
(2)配制和用量
純的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液計)。但由于肝素制劑的純度高低以及其保存時間長短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理鹽溶液,用時取0.1毫升于試管內,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。也可將抽血注射器用配好肝素濕潤一下管壁,直接抽血至注射器內而使血液不凝。在動物實驗作全身抗凝時,一般劑量為:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g體質量,兔10mg/kg體質量,狗5~10mg/kg體質量。肝素可改變蛋白質等電點,因此當用鹽析法分離蛋白質作蛋白質各部分的測定時,IL-2Relisa試劑盒不可采用肝素。市售的*溶液每毫升含肝素12500U,相當于100mg。
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