當前位置:上海研生實業有限公司>>科研抗體>>一抗>> 0.1ml/100μg 0.2ml/200μgAnti-Leptin receptor(long)抗體
產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 | 中文名稱 | 瘦素受體抗體(長) |
規格 | 0.1ml/100μg?0.2ml/200μg | 貨號 | YSRIBIO-017823 |
中文名稱 瘦素受體抗體(長)
英文名稱 Anti-Leptin receptor(long)
濃 度: 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Mouse
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
產品類型 一抗
研究領域 心血管 信號轉導 生長因子和激素
蛋白分子量 predicted molecular weight:
132kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Leptin receptor C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
別 名 obl; CD 295; CD295; CD295 antigen; Db; Fa; HuB219; LEP R; LEPR; LEPROT; Leptin receptor fatty; Leptin receptor gene related protein; Leptin receptor precursor; OB R; OB R gene related protein; OB receptor; OB-RGRP; Obr.
產品名稱 | |
規格 | 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg |
貨號 | YSRIBIO-017823 |
抗體的熒光標記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發波長為492nm,發射光波長為525nm)共價結合。與FITC結合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產量(發射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯物的穩定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
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氯化乙膽生物標記的羊抗小鼠IgG4-
氯化乙膽PE-CY5標記的兔抗豚鼠IgM4-
氯化乙膽PE標記的羊抗大鼠IgG2-氯
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特立Alexa Fluor 647標記的羊抗兔IgG3-氯
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