細胞系檢測方法主要包括以下幾種：

1.光學顯微鏡和倒置顯微鏡

(1)未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。

(2)染色細胞：常用吉姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。

2.熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡

一般以細胞核染色質的形態(tài)學改變?yōu)橹笜藖碓u判細胞凋亡的進展情況。常用的DNA特異性染料有：HO33342(Hoechst 33342)，HO33258(Hoechst 33258)和DAPI。這些染料與DNA的結合是非嵌入式的，主要結合在DNA的A-T堿基區(qū)。紫外光激發(fā)時發(fā)射明亮的藍色熒光。Hoechst是與DNA特異結合的活性染料，儲存液用蒸餾水配成1mg／ml的濃度，使用時用PBS稀釋成終濃度為2～5mg／ml。DAPI為半通透性，儲存液用蒸餾水配成1mg／ml的濃度，使用終濃度一般為0. 5～1mg／ml。

Hoechest 33258是膜透性的，因此在活細胞時候能輕松進入；DAPI是半透性的，有選擇性地進入細胞。因此Hoechest 33258一般用來染活細胞，可以直接進入細胞；DAPI一般是染固定細胞。兩者都可以用紫外線看，參見以下的激發(fā)發(fā)射波長：Hoechst 33258的Z大激發(fā)波長為346nm，Z大發(fā)射波長為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后，Z大激發(fā)波長為352nm，Z大發(fā)射波長為461nm。DAPI的Z大激發(fā)波長為340nm，Z大發(fā)射波長為488nm；DAPI和雙鏈DNA結合后，Z大激發(fā)波長為364nm，Z大發(fā)射波長為454nm。

吖啶橙是Z經典的靈敏的熒光染料，它可通過與DNA和RNA的連接堿基對和磷酸鹽基團結合，使細胞中的DNA和RNA同時染色而顯示不同顏色的熒光。吖啶橙在稀溶液中呈綠色；在濃溶液中，由于出現(xiàn)二聚體和多聚體而呈現(xiàn)橙紅色。由于DNA是高度聚合物，吸收熒光物質的位置較少，故發(fā)綠色熒光：而RNA聚合度低，能和熒光物質結合的位置多，故發(fā)紅色熒光。在熒光顯微鏡下，細胞核DNA為黃綠色均勻熒光，細胞質和核仁的RNA為橘黃或橘紅色熒光。出現(xiàn)細胞凋亡時，細胞核或細胞質內可見致密濃染的黃綠色染色，或核染色呈新月形聚集于核膜一邊；晚期可見黃綠色圓形小體，即凋亡小體。細胞壞死時，細胞質內黃綠色或橘黃色熒光均可減弱或消失。

結果評判：細胞凋亡過程中細胞核染色質的形態(tài)學改變分為三期：Ⅰ期的細胞核呈波紋狀或呈折縫樣，部分染色質出現(xiàn)濃縮狀態(tài)；aⅡ期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；bⅡ期的細胞核裂解為碎塊，產生凋亡小體。

3.透射電子顯微鏡觀察

凋亡細胞體積變小，細胞質濃縮。凋亡Ⅰ期的細胞系核內染色質高度盤繞，出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象的空泡結構；Ⅱ期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；細胞凋亡的晚期，細胞核裂解為碎塊，產生凋亡小體。
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細胞系