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SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 使用說明書

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SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7使用說明書:
細胞名稱 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 
形態(tài)特性 成纖維細胞樣  
生長特性 貼壁生長 
特征特性 該細胞株源自CV-1細胞株,經轉染起始點缺失的SV40病毒突變體得到;編碼表達野生型T抗原,所以該細胞適合作為需要SV40 T抗原表達的載體的轉染宿主。該細胞表達T抗原,允許SV40病毒的溶解性生長,支持40℃時溫度敏感性A209病毒的復制,支持起始區(qū)域缺陷的SV40突變體的復制。因含病毒的DNA序列,該細胞需要在*中操作。 
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS 
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次 
傳代情況 不詳 
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS  
支原體檢測 陰性      
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它之成份和比例, 制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類, 若因實驗需要, 必須有所不同時, 務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成, 確定細胞適應后, 方進行所需之實驗。
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7 FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單之血清種類培養(yǎng)之。
將培養(yǎng)基置于 37 °C水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之, 移入無菌操作臺內。取出冷凍管, 立即放入37 °C 水槽中快速解凍, 水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿, 否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化后, 以70 % 擦拭冷凍管外部, 移入無菌操作臺內。
依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
對絕大多數(shù)細胞而言,1 % 以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因對DMSO 敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO 者, 則可將解凍后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培養(yǎng)基中,離心300 xg (約1000 rpm),5 分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后, 轉移至培養(yǎng)瓶中, 再放入37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
收到SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7時, 處理方式為︰
1. 于寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask 外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題, 不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。
2. 將原封之T25 flask 靜置于37 °C, 5 % CO2 培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37 °C, 并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基,(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內,依 一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中或細胞已長滿盤, 則將細胞做傳代培養(yǎng)。
Gentiopicroside    龍膽苦苷    20831-76-9    20mg    
Saikosaponin D    柴胡皂苷D    20874-52-6    20mg    
Sakakin    苔黑酚葡萄糖苷    21082-33-7    20mg    
Dendrobine    石斛堿    2115-91-5    20mg    
Magnoflorine    木蘭花堿    2141-09-5    20mg    
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7

 

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