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雌二醇(E2)含量ELISA測試盒?測定步驟

時間:2022/1/18閱讀:690
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雌二醇(E2)含量ELISA測試盒測定步驟:

1.加樣

1.除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化復制因子2抗體

3-Apr凋亡相關蛋白3抗體

ATG18自噬相關蛋白18抗體

ATG4A自噬相關蛋白4A抗體

APOA4載脂蛋白A4抗體

ALOX1212脂氧合酶抗體

Angiotensin III血管緊張素III抗體

ADCY3腺苷酸環化酶3抗體

Angiomotin血管動蛋白抗體

Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗體

phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失調癥蛋白1抗體

ANKRD17錨蛋白重復結構域蛋白17抗體

ALDH1A1胞質乙醛脫氫酶1抗體

ARL3ADP核糖基化樣因子ARL3抗體

15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗體

ABC2乳腺癌增強蛋白2抗體

Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗體

Alpha B Crystallinα晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體

ADORA2B腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體

ARK5AMPK的相關蛋白激酶5抗體


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