小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

小鼠基質金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9)

小鼠核轉錄因子(mouse NF-kB )

小鼠核轉錄因子p65(mouse NF-kBp65)

小鼠硝基酪氨酸(mouse Nitrotyrosine)

小鼠神經肽Y(mouse NPY)

小鼠神經生長因子(mouse NGF)

小鼠神經營養素3(mouse NT-3)

小鼠神經營養素4(mouse NT-4)

小鼠一氧化氮(mouse NO)

小鼠骨保護素(mouse OPG)

小鼠骨橋素(mouse OPN)

小鼠骨鈣素(mouse Osteocalcin)

小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG)

小鼠食欲素A(mouse Orexin A)

小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)

小鼠抑瘤素mouse Oncostatin M(mouse OSM)

小鼠催產素(mouse Oxytocin)

小鼠骨保護素配體(mouse OPGL)

小鼠血小板活化因子(mouse PAF)

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(mouse PAP)

小鼠血小板相關抗體IgG(mouse PAIgG)

小鼠增殖細胞核抗原(mouse PCNA)