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原代細胞外基質(zhì)對MSCs擴增的誘導作用
ECM是組成間質(zhì)和上皮–血管中基質(zhì)的不溶性結(jié)構(gòu)成分。它不僅是細胞的機械支持結(jié)構(gòu), 也是供給營養(yǎng)和免疫應答的場所。ECM參與調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育進程, 決定細胞的黏附與遷移, 在創(chuàng)傷修復和纖維化、細胞的生長、增殖、分化、代謝和腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移中均起著重要作用。作為MSCs微環(huán)境的一個重要組成部分, 研究發(fā)現(xiàn)在纖維黏連蛋白鋪層的培養(yǎng)皿中擴增的MSCs, 可以更好地維持多向分化能力。Z近, 陳曉東課題組建立了一種采用MSCs細胞外基質(zhì)鋪層培養(yǎng)骨髓MSCs的方法, 該培養(yǎng)技術(shù)系統(tǒng)模擬了MSCs的胞外基質(zhì)成分, 同時還可能保留了生長因子等活性成分, 可使干細胞的擴增效率得到明顯提高。這一培養(yǎng)體系的基本操作是首先在普通培養(yǎng)皿中培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細胞(stromal cell), 待細胞長滿后去除活細胞, 保留細胞分泌的胞外基質(zhì)成分, 隨后以此培養(yǎng)皿為載體, 進一步培養(yǎng)擴增新的 MSCs。該研究不僅證實了胞外基質(zhì)在骨髓MSCs微環(huán)境中的重要作用, 同時也為研究干細胞微環(huán)境提供了重要的體外模型。
值得指出的是, 雖然原代細胞外基質(zhì)誘導MSCs增殖的方法*, 但擴增效率很不穩(wěn)定, 不同代次和狀態(tài)的細胞制備出來的細胞外基質(zhì)之間的MSCs擴增效率有較大差異, 高代次的年老細胞制備的基質(zhì)明顯不如低代次的年輕細胞。有趣的是, Chen等的工作也揭示了骨髓源ECM與其他細胞外基質(zhì)一樣也是由納米級的超細纖維構(gòu)成的這一基本事實, 如圖1所示。他們的工作提示, 基于模擬干細胞微環(huán)境的ECM的干細胞培養(yǎng)和擴增方法, 將為大規(guī)模擴增具高度功能性的MSCs提供新的思路并有著較高的可行性。因此, 進一步分析胞外基質(zhì)中的關(guān)鍵成分以指導對仿生支架材料的修飾, 進而建立規(guī)模化的干細胞培養(yǎng)和擴增的微環(huán)境十分必要。
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原代細胞
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