當(dāng)前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>原代細胞污染處理流程
原代細胞污染處理流程
1、將污染的培養(yǎng)液倒掉,轉(zhuǎn)燒瓶口,加入10 mlPBS,適當(dāng)晃動清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。
2、繼續(xù)加入10mlPBS,同樣方法晃動,清洗培養(yǎng)瓶,然后倒掉。
3、繼續(xù)加入5mlPBS,同樣方法洗瓶,主要是培養(yǎng)面,然后倒掉。
4、重復(fù)步驟3再洗。
5、重復(fù)步驟3再洗。
6、加入3-5ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。
7、原代細胞加入3ml雙抗,洗瓶,靜置3-5分鐘,然后吸出。
8、再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。
9、加入10ml培養(yǎng)液,加入2ml雙抗,放置培養(yǎng)箱培養(yǎng),5小時之后,倒掉培養(yǎng)基,加入PBS洗瓶兩次,然后加入胰酶消化,吹打后置于離心機800-1000r/min離心,然后洗一次。置于新的培養(yǎng)瓶里培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。
10、24h之后,視情況換液,若仍然污染嚴(yán)重,培養(yǎng)基渾濁,重復(fù)以上步驟,若看不到污染物,則繼續(xù)步驟1)、3)、4)、6)、8),然后加入培養(yǎng)液培養(yǎng),培養(yǎng)體系加入2ml雙抗。
11、24h之后,若仍污染嚴(yán)重,可再重復(fù)一次,若還污染只能棄之(不過一般沒有出現(xiàn)這種情況),若鏡下不見污染物,則換液PBS洗瓶,原代細胞正常培養(yǎng)。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。