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組織來源 | 肺組織 | 貨號 | GOY-01X1608 |
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產品規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產品名稱 | 原代小鼠肺微血管平滑肌細胞 | 英文名稱 | Mouse Pulmonary Microvascular Smooth Muscle Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X1608 |
組織來源 | 肺組織 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養信息:包被條件
培養基基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%YI蛋白酶小鼠肺微血管平滑肌細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞簡介:
小鼠肺微血管平滑肌細胞分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態:大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺微血管平滑肌細胞采用混合膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠肺微血管平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,
4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
大鼠視網膜小膠質細胞 | 大鼠視網膜前體細胞 |
大鼠胎盤間充質干細胞 | 乙型流感病毒Victoria系/Yamagata系(Bv/By)檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
大鼠胚胎成纖維細胞 | 流感A型/流感H5亞型/流感H7亞型/流感H9亞型檢測試劑盒(四重熒光PCR法) |
大鼠臍帶間充質干細胞 | 人細小病毒B19/內參基因(HPV B19/B-actin)檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠臍靜脈內皮細胞 | 流感A型/B型/Victoria系/Yamagata系(IAV/IBV/Bv/By)檢測試劑盒(四重熒光PCR法) |
大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞 | 新型病毒(20-nCoV)ORF1ab基因/N基因/人內參檢測試劑盒(三重熒光PCR法) |
大鼠羊膜間充質干細胞 | 新型病毒(20nCoV)ORF1ab基因/N基因/人內參(標曲)檢測試劑盒(三重熒光PCR法) |
雜交瘤細胞株;1584CT280.63.79 | 人源內參基因(GAPDH)檢測試劑盒(熒光PCR法) |
小鼠肺微血管內皮細胞 | 流感A型/B型/H1N1亞型/H3亞型檢測試劑盒(四重熒光PCR法) |
小鼠肺動脈內皮細胞 | 新型病毒(20-nCoV)ORF1ab基因和N基因檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
小鼠肺動脈平滑肌細胞 | 腸道病毒EV71/柯薩奇病毒CA16檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
小鼠肺動脈外膜成纖維細胞 | 腦膜炎球屬A/C型(NM-A/NM-C)檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
小鼠II型肺泡上皮細胞 | 原代小鼠肺微血管平滑肌細胞肉毒桿E/F型(CB-E/F)檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
小鼠氣管上皮細胞 | 隱孢子蟲/藍氏賈第鞭毛蟲(CT/GL)檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
梅毒螺旋體(TP)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 肉毒桿A/B型(CB-A/B)檢測試劑盒(雙重熒光PCR法) |
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。
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