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組織來源 | 胚胎組織 | 貨號 | GOY-01X1553 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞簡介:
兔胚胎成纖維細胞分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養(yǎng)常用的飼養(yǎng)層細胞,能產(chǎn)生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優(yōu)于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養(yǎng)提供類似于體內(nèi)的微環(huán)境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。
方法簡介:
實驗室分離的兔胚胎成纖維細胞采用YI蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔胚胎成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 原代兔胚胎成纖維細胞 | 英文名稱 | Rabbit Embryonic Fibroblast Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1553 |
組織來源 | 胚胎組織 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液:0.25%YI蛋白酶兔胚胎成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細胞重新鋪瓶。
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉(zhuǎn)移至適當面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
SW620+luc人結(jié)直腸腺癌+luc細胞專用培養(yǎng)基 | SW620+GFP人結(jié)直腸腺癌+GFP細胞專用培養(yǎng)基 |
SW620/5FU人結(jié)直腸癌氟耐藥株細胞專用培養(yǎng)基 | 單純皰疹病毒 / 人巨細胞病毒 / 水痘-帶狀皰疹病毒檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
SW780人膀胱移行癌細胞專用培養(yǎng)基 | 人皰疹病毒 6 型 /7 型 /8 型檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
T2 (174xcem.T2 )人淋巴母細胞專用培養(yǎng)基 | 麻疹病毒 / 風(fēng)疹病毒 / 腮腺炎病毒檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
T24人膀胱移行癌細胞專用培養(yǎng)基 | 脊髓灰質(zhì)炎病毒 / 呼吸道合胞病毒 / 腸道病毒檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
T47D人乳腺導(dǎo)管癌細胞專用培養(yǎng)基 | 單純皰疹病毒 I 型 /II 型 / 人巨細胞病毒 / 水痘-帶狀皰疹病毒檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
T98G人膠質(zhì)母瘤細胞專用培養(yǎng)基 | 阪崎腸桿檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細胞株;IgM-4 | 單增李斯特檢測試劑盒 |
TE-1人食管癌細胞專用培養(yǎng)基 | 單純皰疹病毒 I 型 / Ⅱ型 / 水痘-帶狀皰疹病毒檢測試劑盒(三重?zé)晒?PCR 法 ) |
TE-12人食管癌細胞專用培養(yǎng)基 | 人皰疹病毒 6 型 /7 型檢測試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
THLE-2人正常肝細胞專用培養(yǎng)基 | 腮腺炎病毒 / 麻疹病毒檢測試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
thp-1人單核白血病細胞專用培養(yǎng)基 | 單純皰疹病毒 / 基孔肯雅病毒檢測試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
TJ905人腦膠質(zhì)瘤細胞專用培養(yǎng)基 | 原代兔胚胎成纖維細胞單純皰疹病毒 I 型 /II 型檢測試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
TOV-112D人上皮性卵巢癌細胞專用培養(yǎng)基 | 人細小病毒 B19/ 新型細小病毒 PARV4 檢測試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
乳桿(LB)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 麻疹病毒 / 風(fēng)疹病毒檢測試劑盒 / 含內(nèi)標(雙重?zé)晒?PCR 法 ) |
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