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組織來源 | 腦組織 | 貨號 | GOY-01X1567 |
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產品規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
原代兔腦成纖維細胞
英文名稱 | Rabbit Brain Fibroblast Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1567 |
培養信息:包被條件
培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液:0.25%YI蛋白酶兔腦成纖維細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。
兔腦成纖維細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。 |
方法簡介:
實驗室分離的兔腦成纖維細胞采用YI蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔腦成纖維細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1. 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和 非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養后,細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
4. 器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。
1. 取材的組織要盡快培養。如若不能及時培養,可將組織浸泡于培養液內,放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養。
3. 組織塊不易貼壁,可預先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養的1~2d內要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染,一旦發現,要及時清除。
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