當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>兔原代細(xì)胞>> 原代兔卵巢成纖維細(xì)胞
組織來源 | 卵巢組織 | 貨號 | GOY-01X1495 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
兔卵巢成纖維細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面,其主要特點(diǎn)和功能:①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng);②卵巢損傷后,成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢;③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴(kuò)散。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵巢成纖維細(xì)胞采用YI蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔卵巢成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 原代兔卵巢成纖維細(xì)胞 | 英文名稱 | Rabbit Ovarian Fibroblast Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1495 |
組織來源 | 卵巢組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)信息:包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液:0.25%YI蛋白酶兔卵巢成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
HT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | HT-1376人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
HT-29 (HT29)人結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 輪狀病毒 A 組檢測試劑盒 |
HTMC人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 輪狀病毒 B 組檢測試劑盒 |
HTR-8/SVneo人絨毛膜滋養(yǎng)層 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 諾如病毒 I 型檢測試劑盒 |
HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 輪狀病毒 C 組檢測試劑盒 |
HUCCT1人膽管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 諾如病毒Ⅱ型檢測試劑盒 |
HUH-6人肝母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 諾如病毒Ⅳ型檢測試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;2D4 | 札如病毒檢測試劑盒 |
huh-7.5.1人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 輪狀病毒 H 組檢測試劑盒 |
HUT-78人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 大腸桿 O157/ 單核細(xì)胞增生李斯特 / 副溶血性弧檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
HUTU-80人十二脂腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 沙門氏 / 單核細(xì)胞增生李斯特 / 副溶血性弧檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 副溶血性弧毒力基因( TLH/TDH/TRH )檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
HUVEC+RFP人臍靜脈內(nèi)皮永生化+RFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 原代兔卵巢成纖維細(xì)胞諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / 輪狀病毒 A 組檢測試劑盒 ( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
HUVEC+GFP人臍靜脈內(nèi)皮永生化+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / 札如病毒檢測試劑盒 ( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
霍亂弧O1(VC O1)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / Ⅳ型檢測試劑盒( 三重?zé)晒?PCR 法 ) |
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