當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 原代小鼠骨髓單個核細(xì)胞
組織來源 | 骨髓 | 貨號 | GOY-01X1412 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
生長特性 | 半貼壁半懸浮 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細(xì)胞簡介:
小鼠骨髓單個核分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細(xì)胞是骨髓中具有單個核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是(mononuclear cell)單個核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞。單個核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和泛影鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,可將各種血細(xì)胞與單個核分離。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠骨髓單個核采用取骨髓、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠骨髓單個核經(jīng)過檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠骨髓單個核細(xì)胞 | 英文名稱 | Mouse Bone Marrow Mononuclear Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1412 |
組織來源 | 骨髓 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
抗人TNFRII小鼠雜交瘤細(xì)胞;2H1 | 抗人IgE小鼠雜交瘤細(xì)胞;2G9 |
抗人IgG小鼠雜交瘤細(xì)胞;2C4 | 人腺病毒B16型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗人IgA雜交瘤細(xì)胞;6E9 | 人腺病毒D15型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗人白蛋白雜交瘤細(xì)胞;7G1 | 人腺病毒D13型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗人IgM小鼠雜交瘤細(xì)胞;3C6 | 人腺病毒B14型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗SARS病毒N蛋白小鼠雜交瘤細(xì)胞;S01 | 人腺病毒A12型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗SARS病毒N蛋白雜交瘤細(xì)胞;SO2 | 人腺病毒B11型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 | 人腺病毒D10型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗赭曲霉毒A雜交瘤細(xì)胞;Z01 | 人腺病毒D17型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗黃曲霉毒B1小鼠雜交瘤細(xì)胞;B01 | 人腺病毒A18型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗CEA小鼠雜交瘤;C1 | 人腺病毒D19型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗CEA小鼠雜交瘤細(xì)胞;C2 | 人腺病毒D20型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗肝細(xì)胞生長因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞;HGF1 | 原代小鼠骨髓單個核細(xì)胞人腺病毒B21型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
抗肝細(xì)胞生長因子(HGF)雜交瘤細(xì)胞;HGF2 | 人腺病毒D22型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
豬水皰病毒(SVDV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 人腺病毒D23型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
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