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原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

參  考  價:1 - 600 /件
具體成交價以合同協議為準
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    上海市

更新時間:2025-04-27 10:48:58瀏覽次數:49次

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原代細胞
細胞培養
組織來源 脈絡膜組織 貨號 GOY-01X1229
產品規格 5×105Cells/T25培養瓶 細胞形態 內皮細胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實驗
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原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞


產品名稱

原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

英文名稱

Mouse Choroidal Microvascular Endothelial Cells

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

GOY-01X1229

組織來源

脈絡膜組織

細胞形態

內皮細胞樣

培養信息:

包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)

培養基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

細胞簡介:

小鼠脈絡膜微血管內皮分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用,對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養和遮光作用。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮采用膠原酶-中性dan白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:

公司實驗室分離的小鼠脈絡膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 


原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,

4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。

原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

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原代小鼠脈絡膜微血管內皮細胞

1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:

取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。

2、細胞傳代:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

3、細胞凍存:

1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;

4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。

4、細胞復蘇:

1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;

4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。



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