當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 原代小鼠皮膚肥大細(xì)胞
組織來源 | 皮膚組織 | 貨號(hào) | GOY-01X0990 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
生長特性 | 懸浮 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠皮膚肥大細(xì)胞 | 英文名稱 | Mouse Skin Mast Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X0990 |
組織來源 | 皮膚組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠皮膚肥大分離自皮膚組織;皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細(xì)胞因子,參與免疫調(diào)節(jié)(T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化)。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子、B7分子,具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體,釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能,和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣,具有強(qiáng)嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類顆粒,含有肝素、組織胺、5-羥色胺,由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)(炎癥)。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個(gè)分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠皮膚肥大采用膠原酶-yi蛋白酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠皮膚肥大經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;C8166 | 人急性髓性白血病細(xì)胞;KG-1a |
人結(jié)直腸癌細(xì)胞;DiFi | 斑點(diǎn)病密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人B淋巴細(xì)胞;WIL2-S [WIL2S] | 齒垢密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肺癌細(xì)胞;H1299 | 梅毒螺旋體梅毒亞種探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人淋巴瘤細(xì)胞;Romas | 豬痢疾密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;J-111 | 梅毒螺旋體(蒼白密螺旋體)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肝癌細(xì)胞;Hep-3B2.1-7 | 極細(xì)密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠肺成纖維樣細(xì)胞;2011109L | 潰蝕齒密螺旋體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞;Jurkat CA | 剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人黑色瘤細(xì)胞;M21 | 豬托克特諾病毒(豬細(xì)環(huán)病毒)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人外周血B淋巴細(xì)胞;IM-9 | 尤氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肺癌細(xì)胞;TKB-1 | 泰勒屬原蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肝癌細(xì)胞;HHCC | 原代小鼠皮膚肥大細(xì)胞瑟氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人肝癌細(xì)胞;HB611 | 小泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
中華絨螯蟹螺原體檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> | 東方泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
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