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原代小鼠肝星狀細(xì)胞

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 肝臟組織 貨號 GOY-01X0845
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗
原代小鼠肝星狀細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SNU-81結(jié)腸癌NCI-H647細(xì)胞NCI-H661細(xì)胞NCI-H69細(xì)胞NCI-H720[H720]細(xì)胞NCI-H727[H727]細(xì)胞NCI-H740[H740]細(xì)胞NCI-H747細(xì)胞NCI-H774細(xì)胞NCI-H810細(xì)胞

原代小鼠肝星狀細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

小鼠肝星形分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細(xì)胞(HSC)又名肝貯脂細(xì)胞、貯存細(xì)胞、竇周細(xì)胞、Ito細(xì)胞等,是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源。HSC在激活后可進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,各種可導(dǎo)致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細(xì)胞。正常情況下,HSC處于靜止?fàn)顟B(tài),當(dāng)肝臟發(fā)生炎癥反應(yīng)或受到機(jī)械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉(zhuǎn)變?yōu)榧せ钚停せ畹腍SC可通過增生和分泌細(xì)胞外基質(zhì)參與肝纖維化的形成及肝內(nèi)結(jié)構(gòu)的重建,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細(xì)胞分布于肝臟的Disse間隙內(nèi),是合成、分泌細(xì)胞外基質(zhì)的主要來源,在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細(xì)胞是肝臟的間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。此外,肝星形細(xì)胞能通過合成肝細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。
方法簡介:

公司實(shí)驗室分離的小鼠肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗室分離的小鼠肝星狀經(jīng)α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代小鼠肝星狀細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代小鼠肝星狀細(xì)胞

英文名稱

Mouse Hepatic Stellate Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0845

組織來源

肝臟組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代小鼠肝星狀細(xì)胞


原代小鼠肝星狀細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。原代小鼠肝星狀細(xì)胞

原代小鼠肝星狀細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代小鼠肝星狀細(xì)胞

人膀胱移行細(xì)胞癌;SW780[SW-780,SW780]

人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4

小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞;K7M2wt[K7M2-WT]

腔闊盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag1.2.3

羊闊盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞;Y1

闊盤吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌);NCI-H460

胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

BALB/c小鼠胚胎細(xì)胞;BALB/c3T3cloneA31

皮炎外瓶霉探針法熒光定量PCR試劑盒

人結(jié)腸癌細(xì)胞;Caco-2

大片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;HCC827

肝片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

兔腎細(xì)胞;RK-13

埃希氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

水貂肺細(xì)胞;Mv1Lu(NBL-7)

埃希氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

人宮頸癌細(xì)胞;C-33A

丹毒絲菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

豬睪丸細(xì)胞;ST

紅斑丹毒絲菌(豬丹毒桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒

人宮頸癌細(xì)胞;SiHa

原代小鼠肝星狀細(xì)胞腺熱埃里希體探針法熒光定量PCR試劑盒

土撥鼠肝細(xì)胞;WCH-17

馬鼻肺炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒

對蝦黃頭病毒(YHV)RNA檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span>

馬鼻炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒




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