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組織來源 | 外周血 | 貨號 | GOY-01X1244 |
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產品規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 圓形 |
生長特性 | 懸浮 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞簡介:
大鼠外周血中性粒分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞是一類無色、球形、有核的血細胞。白細胞不是一個均一的細胞群,根據其形態、功能和來源部位可以分為三大類:粒細胞、單核細胞和淋巴細胞,其中粒細胞又可根據胞質中顆粒的染色性質不同,分為中性粒細胞、嗜酸粒細胞和嗜堿粒細胞三種。中性粒細胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞質呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.2~0.4微米)淺紅或淺紫色的顆粒。細胞核呈桿狀或2~5分葉狀,葉與葉間有細絲相連。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。中性粒細胞來源于骨髓,具有分葉形或桿狀的核,胞漿內含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒。這些顆粒多是溶酶體,內含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,與細胞的吞噬和消化功能有關。中性粒細胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,它處于機體抵御微生物病原體,特別是在化膿性細菌入侵的線,具有很強的吞噬活性,可吞噬細菌、衰老的紅細胞、抗原一抗體復合物和壞死的細胞等。中性粒細胞內含有大量溶酶體酶,因此能將吞噬入細胞內的細菌和組織碎片分解。當中性粒細胞吞噬數十個細菌后,自身發生解體,所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細胞是人體內壽命最短的細胞,一般體外培養12-24h內活性穩定,48h活性下降,96h基本死亡。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠外周血中性粒經瑞氏染色法,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 原代大鼠外周血中性粒細胞 | 英文名稱 | Rat Peripheral Blood Neutrophil Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X1244 |
組織來源 | 外周血 | 細胞形態 | 圓形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,
4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。
人腦星形膠質母細胞瘤(紅色標記 ) | 人神經母細胞瘤細胞Luciferase熒光穩轉株 |
人膽囊癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 鼻血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人肺腺癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 梭形血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
小鼠黑色瘤細胞Luciferase熒光穩轉株 | 施馬倫貝格病毒PCR檢測試劑盒 |
人肝癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 血吸蟲通用PCR檢測試劑盒 |
人結直腸癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 塞姆利基森林病毒PCR檢測試劑盒 |
人結直腸腺癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 仙臺病毒PCR檢測試劑盒 |
AsPC-1 人轉移胰腺腺癌細胞 | 塞內加谷病毒PCR檢測試劑盒 |
人結腸癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 羊血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人喉表皮癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 印度血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
鼻咽癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 不明血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人高轉移卵巢癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 柯拉松血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人胃癌細胞Luciferase熒光穩轉株 | 原代大鼠外周血中性粒細胞牛血吸蟲PCR檢測試劑盒 |
人胚腎上皮細胞 | 疥螨通用PCR檢測試劑盒 |
水稻內源基因檢測試劑盒(恒溫熒光法) | 馬疥螨PCR檢測試劑盒 |
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