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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>大鼠原代細(xì)胞>> 原代大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞
組織來(lái)源 | 腦組織 | 貨號(hào) | GOY-01X1037 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種,相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是最主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%,小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無(wú)數(shù)臨床上和神經(jīng)理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機(jī)理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過(guò)多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來(lái)源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能:①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過(guò)程中;②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí),或在大腦發(fā)育的過(guò)程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理?yè)p壞時(shí),神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞;③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽(yáng)性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法,在培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 原代大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞 | 英文名稱 | Rat Microglia Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X1037 |
組織來(lái)源 | 腦組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 利多ka因(12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來(lái),
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
人肺癌耐藥株;A549/cis | 人B淋巴細(xì)胞母細(xì)胞;NTCC721.221 |
人大細(xì)胞肺癌耐藥株;NCI-H460/cis | 鳥類多瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞;KU812 | 禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞;MC38 | 禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞;MEG-01 | 同禽病毒性關(guān)節(jié)炎病毒禽呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人舌鱗癌細(xì)胞;SCC15 | 禽輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人星形膠質(zhì)細(xì)胞;HA | 禽類肉瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人肺腺癌細(xì)胞 | 同禽病毒性關(guān)節(jié)炎病毒禽腱鞘炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-528 | 禽肺病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胃癌細(xì)胞;MKN-45-Cas9-526 | 禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-527 | 禽副粘病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-529 | 禽副粘病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-534 | 原代大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞禽正呼腸孤病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-532 | 禽腎炎病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
人皰疹病毒 6 型 /7 型檢測(cè)試劑盒(雙重?zé)晒?PCR 法 ) | 禽腎炎病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
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