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組織來源 | 淋巴管 | 貨號 | GOY-01X0787 |
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產品規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產品名稱 | 原代人淋巴管內皮細胞 | 英文名稱 | Human Lymphatic Endothelial Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X0787 |
組織來源 | 淋巴管 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人淋巴管內皮分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態結構與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發達,外形呈串珠狀。淋巴管根據其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經過一個或多個淋巴結,從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴管內皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內表面的一種單層扁平上皮,是構成淋巴管壁的主要結構,參與維持體液平衡,調節淋巴細胞再循環和機體的免疫反應和組織液及蛋白質的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉移密切相關。淋巴管內皮細胞主要功能:①調節體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統的重要組成部分。淋巴管內皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結核。
方法簡介:
公司實驗室分離的人淋巴管內皮采用中性dan白酶消化法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人淋巴管內皮經VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,
4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
大鼠羊膜間充質干細胞 | 大鼠胰島細胞 |
大鼠胰腺導管上皮細胞 | 糞便DNA/RNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠胰腺腺泡上皮細胞 | DNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠胰腺星狀細胞 | Simply P 總RNA提取試劑盒 |
大鼠真皮毛乳頭細胞 | 總RNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠支氣管平滑肌細胞 | 病毒RNA提取試劑盒(磁珠法) |
大鼠支氣管上皮細胞 | 病毒RNA提取試劑盒(磁珠法,預分裝) |
人卵巢癌細胞 | 病毒RNA提取試劑盒(磁珠法,預分裝,快提) |
大鼠脂肪微血管內皮細胞 | 病毒DNA/RNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠脂肪細胞 | 基因組DNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠脂肪血管基質細胞 | 病毒總核酸提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠中耳上皮細胞 | 病毒RNA提取試劑盒(吸附柱法) |
大鼠主動脈瓣膜間質細胞 | 原代人淋巴管內皮細胞甲型 / 乙型流感病毒檢測試劑盒(干燥型 / 雙重熒光 PCR 法) |
大鼠主動脈弓內皮細胞 | 沙門氏菌 / 志賀氏菌檢測試劑盒(干燥型 / 雙重熒光 PCR 法) |
N7 亞型流感病毒檢測試劑盒 | 霍亂弧菌 O1/O139 檢測試劑盒(干燥型 / 雙重熒光 PCR 法) |
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。
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