產品名稱：Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)說明書
規格：100次
儲存條件:—20℃,12個月
用途:又稱培養細胞消化液,用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項:無菌溶液，經過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料：
1、 PBS、Hanks液或無血清培養液
2、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考)：
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項：
1、 盡量減少反復凍融的次數，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中，要特別注意避免消化液被細菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。使用說明： 
1. 貼壁細胞的消化： 
a.吸去培養液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細胞消化液(含酚紅，不含EDTA)，略蓋過細胞，室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。 
c.顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液(含酚紅，不含EDTA)。加入含血清的*細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。 
d.如果發現消化不足，則加入胰酶細胞消化液(含酚紅，不含EDTA)重新消化。 如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液(含酚紅，不含EDTA)后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。 
2. 組織的消化： 
a.不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄：不同胰酶細胞消化液的比較和選擇 
1. 如果希望消化能力比較強，推薦選擇C0201胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅)，這兩種胰酶細胞消化液都含有EDTA，消化能力相對更強一些。 
2. 如果希望觀察比較方便，推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅，不含EDTA)。 
3. 對于酚紅可能會干擾后續的測試分析，推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)。 
4. 對于EDTA可能會干擾后續的測試分析時，推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶，含酚紅，不含EDTA)。 
5. 對于胰酶特別敏感的細胞，即對于消化時間特別快、消化時間比較難控制的情況，推薦選擇C0202胰酶細胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
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