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小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞:SRSV/3T3

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-10 15:13:07瀏覽次數(shù):135次

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貨號(hào) GOY-01X0526
小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞:SRSV/3T3 公司正在出售的產(chǎn)品:1g 5,5- 二硫代雙 (2- 苯甲酸 ) (5,5’-Dithiobis(2-Nitrobenzoic Acid) 室溫干燥保存50T 鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存20次 免疫蛋白清除劑 2 ug pXeX pXeX 低溫運(yùn)輸,-20℃保存10次 Southern級(jí)真菌DNAout

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞:SRSV/3T3 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號(hào)

GOY-01X0526

商品介紹:

名稱 小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞:SRSV/3T3 

生長(zhǎng)特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)圓形

背景描述SRSV/3T3細(xì)胞是NIH/3T3細(xì)胞用SRS小鼠腹水瘤無(wú)細(xì)胞提取物感染并在體外傳代培養(yǎng)而來(lái)。在感染過(guò)的NIH/3T3細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中發(fā)現(xiàn)了A型和C型病毒顆粒,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中有逆轉(zhuǎn)錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。用這個(gè)培養(yǎng)SRSV/3T3細(xì)胞對(duì)BALB/c裸鼠進(jìn)行皮下接種,100%誘導(dǎo)生成纖維肉瘤。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1×10^5-1×10^6個(gè)/mL

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO2,5%

溫度:37℃

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

CD16a / FCGR3A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

CD19 / Leu-12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

COQ7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

IL-29 / Interleukin-29 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

恒河

小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞:SRSV/3T3 Bcl-2  Bcl-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

EIF5  真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml

C1orf94  1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框94抗體 規(guī)格: 0.2mlXAF1/FBXO39  XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Gentamicin(3G7)  單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

1mL RNA Sample Buffer (without EB)  RNA Sample Buffer (without EB)  常溫保存

MAD1  Mad1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-NFKB1(Ser893)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

RAB21  G蛋白家族RAB21蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Uricase  尿酸 規(guī)格: 0.1mlCD2  CD2抗體 規(guī)格: 0.1ml

OCIAD2  卵巢免疫反應(yīng)抗原抗體 規(guī)格: 0.2mlRNF113B  環(huán)指蛋白113B抗體 規(guī)格: 0.2ml

10次 糖蛋白染色試劑盒 Staining Kit for Glycoprotein -20℃保存

100mL 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B Sepharose CL-6B  4-8℃保存

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